| 성상 | 투명하거나 약간 혼탁한 무색 또는 담황색의 액체 |
|---|---|
| 업체명 | 한국존슨앤드존슨메디칼(주) |
| 위탁제조업체 | Ortho Clinical Diagnostics Inc. |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2003-11-03 |
| 품목기준코드 | 200308005 |
| 표준코드 | 8806508003701, 8806508003718, 8806508003725, 8806570000103, 8806570000110, 8806570000127 |
총량 : 10밀리리터/바이알 - 항D 혈청시약 | 성분명 : 항D사람 단클론항체(세포주:MAD-2) | 분량 : 33 | 단위 : ug/ml | 규격 : . | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 10밀리리터/바이알 - 항D 혈청시약 | 성분명 : 사람혈청 유래 항D IgG 풀 | 분량 : 3.3 | 단위 : ug/ml | 규격 : . | 성분정보 : | 비고 :
사람 적혈구의 D(Rho) 항원 검출을 위한 검사용 시약
1. 검체준비 및 저장방법
혈액검체는 승인된 의료기관 절차에 따라 채취되어야 하며, 가능한 빨리 실험을 수행하여야 한다. 검사시간이 지연될 때는 검체를 2-8˚C에 보관해야 한다. 항응고제가 처리되지 않은 혈액 또는 sodium citrate, EDTA가 함유된 혈액은 채취일로부터 14일 이내에 시험되어야 한다. 특히 헤파린 또는 Oxalate 항응고제가 함유된 혈액은 2일 이내에 사용되어야 하며, 헌혈 혈액검체는 유효기간 이내에 실험되어야 한다.
2. 검사 전 준비과정
모든 시약과 기구는 실온(18~25˚C) 상태를 유지하며 시험을 수행한다. 등장액(isotonic saline) 및 슬라이드, 시험관 랙 등을 준비한다. 시험에 사용되는 적혈구 부유액은 채취한 혈액을 1000~2000g에서 5분간 원심 침전한 적혈구 층으로 준비한다.
3. 개봉된 시약의 저장방법 및 사용기간
개봉된 시약은 2-8˚C에서 보관
4. 검사과정
가. 슬라이드 검사법
1) 등장액(isotonic saline)으로 40~50 v/v % 적혈구 부유액을 제조한다.
2) 40-50˚C인 청결한 유리슬라이드(glass slide) 위에 약 한 방울(약 50µL)의 시약(Anti-D BioClone)을 떨어 뜨린다.
3) 유리슬라이드 위의 Anti-D BioClone 시약에 40~50 v/v % 적혈구부유액을 두 방울(약 100ul)을 떨어뜨린다.
4) 개별적으로 깨끗한 applicator stick을 이용하여 적혈구 부유액과 시약을 20~30 mm 정도의 원형으로 퍼지게 잘 혼합한다.
5) 유리 슬라이드를 천천히 전후좌우로 흔들고 움직이면서 미세한 적혈구 응집을 관찰한다.
6) 결과를 기록하고 판정한다.
나. 시험관 검사법
1) 등장액(isotonic saline), 자가혈청 또는 혈장으로 3-5%의 적혈구 부유액을 준비한다.
2) 각 시험관에 Anti-D BioClone 시약 한 방울(약 50µL)을 넣는다.
3) 준비된 dropper로 3-5%의 적혈구 부유액을 동량 넣는다.
4) 시험관의 내용물을 잘 혼합한다.
5) 3400rpm (900-1000rcf)에서 15-30초 또는 1000rpm(100-124rcf)에서 1분(또는 이에 상응하는 방법으로) 원심분리한다.
6) 시험관 밑에 침전된 혈구를 서서히 흔들어 재부유 시키면서 응집유무를 관찰한다.
7) 결과를 기록하고 판정한다.
8) 응집이 나타나지 않거나 Weak D에 대한 결정이 필요하면 Weak D Test법을 따른다.
다. 간접항글로불린 검사법(Weak D 검사법)
1) 등장액(isotonic saline), 자가혈청 또는 혈장으로 3-5%의 적혈구 부유액을 준비한다.
2) 시험관에 anti-D BioClone 시약 한 방울(약 50µL)을 넣는다.
3) 준비된 dropper로 3-5%의 적혈구 부유액을 동량 넣는다.
4) 시험관의 내용물을 잘 혼합한다.
5) 시험관을 37±1˚C에서 최소 15분 배양한다.
6) 등장액(isotonic saline)을 시험관에 가득 채워 적혈구를 3회 세척하고, 마지막 세척 후에는 잔존물을 완전히 제거한다.
7) Anti-IgG가 포함된 Anti Human Globulin 2 방울(약 100µL)를 각 시험관 안에 첨가한다. (Anti human Globulin은 제조자의 사용설명서를 따른다.)
8) 3400rpm (900-1000rcf)에서 15-30초 또는 1000rpm(100-124rcf)에서 1분(또는 이에 상응하는 방법으로) 원심분리한다.
9) 시험관 밑에 침전된 혈구를 서서히 흔들어 재부유 시키면서 응집유무를 관찰한다.
10) 결과를 기록하고 판정한다.
11) 제조사의 사용설명서에 따라서 IgG가 감작된 적혈구를 첨가하여 음성 테스트의 입증을 확인한다.
5. 결과판정
가. 슬라이드 검사법
1) 양성: 적혈구응집은 수초 이내에 응집되기 시작하여 2분 이내에 응집되는 것.
※ 적혈구 응집여부 관찰은 2분을 초과하지 말아야 하며, 항원항체의 결합이 아니라 말초혈액의 건조 또는 fibrin strands에 의하여 응집이 되지 않도록 주의하여야 한다.
2) 음성: 2분 이 후에 어떤 응집도 보이지 않아야 한다.
나. 시험관 검사법
1) 양성 : 적혈구 응집
2) 음성 : 어떤 응집도 보이지 않아야 한다.
6. 정도관리
검사 당일 수행한 heterozygous (weak) 양성과 음성 정도관리물질의 반응성에 따라야 한다.
가. 양성정도관리물질
시약에 들어 있는 항체와 반응하는 항원으로서 확인된 적혈구 등을 자체적으로 확립 또는 구매하여 준비한다.
나. 음성정도관리물질
시약에 들어 있는 항체와 반응하지 않는 항원으로서 확인된 적혈구 등을 자체적으로 확립 또는 구매하여 준비한다.
1. 체외진단용으로만 사용해야 한다.
2. 모든 혈액제품은 감염 가능성이 있는 물질로 보고 주의 깊게 취급하여야한다. 혈액 및 혈액과 접촉한 물질은 확립된 비임상 시험 기준에 따라 취급할 것을 권장한다.
3. 일부 성분은 위험 물질이나 잠재적인 감염 가능성이 있는 폐기물로 간주된다. 적절한 지침이나 규정에 따라 모든 물질을 폐기한다.
4. 본 제품들의 원료 물질은 현 FDA 검사 기준에 따라 검사했을 때 B형 간염 표면 항원(HBsAg), C형 간염 바이러스(HCV)에 대한 항체, 인체 면역결핍 바이러스 1형(HIV-1) 및 2형(HIV-2)에 대해 음성 결과를 보였다. 인체 혈액 기인 제품이 감염원을 전파시키지 않을 것이라고 보장할 수 있는 알려진 검사법은 없다.
5. 감염 위험성이 있는 쥐나 소 유래 물질을 함유하고 있으므로 이들 시약을 입으로 피펫하지 않는다.
6. 보관 상태가 부적절하면 제품 성능에 나쁜 영향을 준다.
7. 라벨에 표시된 사용기한이 지난 시약은 사용하지 않는다.
8. 혼탁해진 경우 세균 오염일 수 있다. 시약의 변질 여부를 알려면 혈청학적 검사가 필요하다.
9. 기술한 검사법에 오염된 혈액 검체 및/혹은 보조 물질을 사용하면 검사결과를 방해할 수 있다.
10. 부적절한 조작으로 진단검사 성능에 잘못된 결과를 얻을 수 있다.
11. 뚜껑 잠금장치가 있는 원심분리기를 사용한다.
12. 최소치를 초과하는 힘을 사용하여 원심분리(overcentrifugation)하게 되면 혈구가 시험관의 바닥에 들러붙어 재부유 시키려면 격렬히 흔들어야 한다. 흔드는 동안 응집력이 약한 부분이 분산되어 양성 반응이 일어나지 않을 수도 있다. 혈구들이 “버튼”과 상청액을 형성하는데 필요한 힘에 못 미치는 부족한 원심분리(undercentrifugation)의 경우 약한 양성 반응 또는 음성 반응이 초래될 수 있다.
13. 본 제제에는 반응 강화제를 포함하고 있지 않다. 이는 일반 사람 혈청과는 달리 면역글로불린으로 코팅된 적혈구의 자발적인 응집의 우려가 있기 때문이다.
14. 혈구와 혈청의 최적 혼합비율은 보통 3-5%적혈구와 시약 각각 한 방울 씩이다. (단, 슬라이드법에서는 전혈 두 방울을 사용.)
| 저장방법 | 2-8℃보관, 밀폐용기 |
|---|---|
| 사용기간 | 제조일로부터 24 개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 10㎖/vial × 제조원 포장단위 |
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