| 성상 | 투명한 미황색의 액상제제 |
|---|---|
| 업체명 | 아산제약(주) |
| 위탁제조업체 | Dominion Biologicals Limited |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2004-04-09 |
| 품목기준코드 | 200410122 |
| 표준코드 | 8806488000103, 8806488000110 |
총량 : 항D 혈청시약 10 mL/바이알 | 성분명 : 단클론 안티-디 아이쥐엠 항체(D175-2) | 분량 : 15 | 단위 : 용량백분율 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(15% v/v)
총량 : 항D 혈청시약 10 mL/바이알 | 성분명 : 단클론 안티-디 아이쥐쥐 항체(D415 1E4) | 분량 : 15 | 단위 : 용량백분율 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(15% v/v)
사람 적혈구의 D 항원 검출을 위한 검사용 시약
1. 원리
이 혈액형 판정시약에 사용된 실험은 직접 응집의 원리에 기반을 둔다. 테스트 적혈구와 DBL사의 NOVACLONETM Anti-D의 배양은 D항원이 적혈구에 존재한다면, 특이항원-항체반응을 일으킨다. 이 반응의 육안 감지는 원심분리에 이은 응집에 의해서 알 수 있다. 응집이 일어나지 않는 것은 음성테스트 결과를 나타내며, 테스트 절차의 인정 한계 내에서, 적혈구에 상응하는 D항원이 존재하지 않음을 의미한다.
2. 검체의 채취
검체채취 이전에 환자나 혈액 공여자에 대한 특별한 준비가 요구되지 않는다. 혈액 검체는 승인된 의료절차에 의해서 채집되어야 한다. 혈액 검체는 항응고제가 첨가되기도 하고 또는 항응고제 없이 채취되어야 한다. 응고된 검체로부터의 적혈구 또는 EDTA 항응고제가 첨가된 검체는 채취 후 14일 이내에 실험되어야 한다. ACP, CPD, CPDA-1의 항응고제가 첨가된 혈액검체는 유효기간 이내에 실험되어야 한다. 모든 적혈구 검체는 1-10℃에서 적절히 보관되어야 한다.
3. 검사방법
(1) 슬라이드 테스트
1) 35-45%의 적혈구 현탁액을 준비한다. 적혈구 현탁액은 식염수, 혈청 또는 혈장으로 준비한다.
2) 40-50㎕의 DBL사 Anti-D 한 방울을 라벨이 붙은 슬라이드의 한쪽 끝에 적하한다.
3) Transfer pipette를 이용하여, 준비된 35-45%의 적혈구 현탁액 2방울을 DBL사 Anti-D에 적하한다.
4) 각각의 깨끗한 교반봉을 이용해서, 적혈구 현탁액을 약 20x40mm의 타원 위에서 완전히 섞는다.
5) 슬라이드를 2분간 전후로 천천히 기울이고, 미세한 응집을 확인한다.
6) 2분 후반기에도 응집이 나타나지 않는 테스트는 음성으로 판정된다. 주변의 건조 또는 피브린 스탠다드를 응집으로 오인하지 않도록 주의한다.
7) 테스트가 음성이거나 weak D테스트가 요구되면, weak D테스트 방법에 따라서 테스트 한다.
(2) 튜브 테스트
1) 식염수를 이용하여 2-4%의 적혈구 현탁액을 준비한다.
2) 40-50㎕의 Anti-D시약 한 방울을 적절하게 라벨이 붙여진 테스트 튜브에 적하한다.
3) Transfer pipette를 이용하여, 준비된 2-4%의 적혈구 현탁액 한 방울을 튜브에 적하한다.
4) 테스트 튜브의 내용물을 완전히 섞는다.
5) 15-30초 동안 900-1000rcf 또는 그에 상응하는 힘으로 원심분리 한다.
6) 천천히 적혈구 버튼을 재 부유시키고, 미세한 응집을 확인한다.
7) 판정하고 결과를 기록한다.
(3) Weak D 테스트
1) 세척된 테스트 적혈구 2-4%의 현탁액을 준비한다. 적혈구는 적어도 한번 잘 세척하고, saline으로 부유시켜야 한다.
2) 40-50㎕의 Anti-D시약 한 방울을 적절하게 라벨이 붙여진 테스트 튜브에 적하한다.
3) Transfer pipette를 이용하여, 준비된 2-4%의 적혈구 현탁액 한 방울을 튜브에 적하한다.
4) 튜브의 내용물을 완전히 섞고, 37℃(+/- 1℃)에서 15분간 배양한다.
5) 각 튜브 안에 있는 적혈구를 saline으로 한번 세척한다.
6) 잔존 saline을 제거하고, 결과적으로 "건조" 적혈구 button을 보장하기 위해서 마지막 세척 후에 saline을 완전히 딸아 버린다.
7) 2방울의 Anti-H Globulin 또는 Anti-IgG를 튜브 안에 첨가한다. (Anti-H Globulin은 제조자의 사용설명서를 따른다.)
8) 적혈구 button을 재 부유시키기 위해서, 천천히 그러나 철저히 섞어준다.
9) 15-30초 동안 900-1000rcf 또는 그에 상응하는 원심력 또는 제조사의 사용설명서에 따라서 원심분리 한다.
10) 천천히 적혈구 버튼을 재 부유시키고, 미세한 응집을 확인한다.
11) 판정하고 결과를 기록한다.
12) 제조사의 사용설명서에 따라서 IgG가 감작된 적혈구와 음성 테스트의 입증을 확인한다.
(4) 마이크로플레이트 테스트
1) 2-4%의 적혈구 현탁액을 식염수로 준비한다.
2) Anti-D를 각 마이크로플레이트의 테스트 well에 한 방울 적하한다.
3) 2-4%의 적혈구 식염수 현탁액 한 방울을 적하한다.
4) 마이크로플레이트를 손으로 뚝뚝 치거나 또는 마이크로플레이트 쉐이커를 혼합함으로서 well의 내용물을 완전히 혼합한다.
5) 
에 20-30초 동안 원심분리 한다.
6) 결과를 판정하고 기록한다.
4. 결과판독
양성(슬라이드, 튜브, 마이크로플레이트검사) : 적혈구의 응집
양성(Weak D검사) : 적혈구의 응집
음성 : 적혈구의 비응집
1. 신생아 제대혈 및 A형 또는 B형의 아형을 갖고 있는 사람의 적혈구, 장기보관과 부적절한 저장조건, 혈구 및 혈청학적 시험간 불일치로 발생할 수 있는 혈청학적 문제 등에 의한 위음성 및 미약반응이 일어날 수 있다.
2. 생체 내에서 면역 글로불린에 코팅된 적혈구의 경우 드물게 일부 시약에서 비특이적 응집을 보일 수 있다. 이런 현상은 고 단백질과 미소분자의 첨가제로 형성된 시약과 보통 관계가 있으며 자사의 시약 또한, 매우 드문 경우지만 저단백질의 매개체에서 비 특이적으로 응집한다. 이런경우, 테스트 세포가 Anti-A, B, D와 반응한다면 608% BSA 또는 자가 이식의 환자 혈청/혈장의 추가적인 실험 대조(control)가 필요하다.
3. 부적절한 검사방법, 부적당한 원심분리 및 배양, 세척으로 인한 유리제품 및 오염물질 등이 위양성 및 위음성 결과를 야기할 수 있다.
4. 세포 및 생리식염수로 부유한 적혈구 등은 연전현상(rouleaux) 또는 자가항체에 의하여 위양성의 결과를 야기할 수 있다.
5. 세척되지 않은 적혈구 또는 자가 이식의 혈청 또는 혈장으로 부유된 적혈구는 약 D에 대한 Modifide Indirect Antiglobulin Test에 사용되어선 안된다. 이것은 세척절차의 간소화와 결과적으로 미약반응 내지는 위음성의 결과를 야기할 수 있다. 이런 경우, Anti-H globulin이 부분적으로 미약반응 및 위음성의 결과를 중화시킬 수 있으며 세척죄지 않은 적혈구가 시험에 사용되어야 한다면, 세 번에서 네 번의 연속 세척을 통해 자존하는 혈청내의 IgG 제거를 통해 효과적인 시험 결과를 얻을 수 있다.
6. 효소로 처리된 적혈구세포를 시험에 사용해서는 안된다. 또한 위양성의 반응을 예방하기 위해 상온918-25℃)에서 시험이 행해져야 한다.
7. 약 D에 대한 양성 rskwjq 항 글로브린 테스트는 적당한 대조(608% BSA)를 사용하여 육안의 음성 Direct Antiglobulin Test 또는 음성의 Indirect Antiglobulin Test에 의해서 그 결과가 입증되어야 한다.
8. 몇몇의 적혈구는 정량적으로 부분의 약 D(꼬1)를 나타내므로 Anti-D와 예상된 반응보다 더 약한 반응을 보일 수 있다.
9. Anti-Dd는 부분 D의 모든 예를 표현하지 못한다. 게다가, 이 시약은 이전에 테스트 되었고 Anti-D의 다른 근원을 이용한 Rh 음성으로 해석된 weak D cells 그리고 부분 D의 드문 예와 반응한다.
10. 장기간 및 부적절한 조건의 적혈구 보관은 위음성 및 기대하지 않은 미약 반응을 야기할 수 있다.
11. 판독시간의 지연, 침전된 적혈구 재부유액 등은 미약반응 및 위음성의 결과를 야기할 수 있다.
12. 아지드나트륨은 유해하므로 섭취하지 않도록 주의해야 한다.
13. 아지드나트륨은 구리와 잡과 반응하여 폭발성의 금속 아지드를 형성하므로 처리할 때에는 아지드의 축적을 방지하기 위해서 다량의 물로 희석하면서 버린다.
14. 이 제품은 천연고무 라텍스 성분을 함유함으로서 알레르기 반응을 일으킬 수 있다.
15. 모든 혈액형 판정시약은 잠재적으로 감염성이 있는 것처럼 다루어진다.
16. 표시된 탁도는 박테리아 감염이나 시약의 질이 떨어졌음을 나타낸다.
17. 오염된 시약이나 라벨이 붙지 않은 바이알 그리고 유통기한이 지난 것은 사용하지 않는다.
18. 동결시키지 않는다.
| 저장방법 | 1-10℃에 동결을 피해서 보관 |
|---|---|
| 사용기간 | 제조일로부터 24 개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 1×10mL, 10×10mL |
| 보험코드 | |
| 보험약가 | |
| 보험적용일 |
서울 부산 인천 대구 광주 대전 울산 경기 강원 충북 충남 전북 전남 경북 경남 제주 세종시
