제네디아 에취비에스에이지 엘리자 4.0 - 의약품 상세정보

1) 혈장 또는 혈청을 검체로 하며, 혈구나 혈액응고성분 등의 고형물은 원심 분리하여 완전히 제거합니다.

2) 검체내에 과산화효소의 활성을 저해하는 물질(예 : 보존제로 쓰이는 질화나트륨)이 함유되어 있을 경우에는 위음성을 보일 수 있으니 주의합니다.

1) 모든 시약은 실험시작 15-30분전에 실온에 둡니다.

2) 밀봉된 항체 흡착 플레이트를 꺼내어 필요한 만큼의 스트립을 남기고 나머지는 프레임에서 빼내어 실리카겔과 함께 밀봉한 후 2-8℃에 보관합니다. 이 때 보관 중인 은박포 내에 습기가 들어가면 항체 역가의 저하를 일으킬 수 있으니 주의합니다.

3) 세척액의 조제

증류수나 이온정제수로 20배 희석하여 필요한 양을 준비합니다. (필요한 세척액량이 200 ㎖ 일 경우 농축세척액 10 ㎖에 증류수나 이온정제수 190 ㎖을 넣어 총 부피가 200 ㎖이 되도록 한 다음 잘 섞어 줍니다.)

농축세척액은 냉장보관 상태에서 결정이 생길 수도 있습니다. 이런 경우에는 따뜻한 물로 결정을 잘 용해한 후에 사용합니다.

4) 접합체액의 제조

사용하기 5-10분전에 농축접합체액(2번병)을 접합체희석액(3번병)으로 1:25의 비율로 필요한 만큼 희석합니다. (시험 시 1 스트립(8웰)당 농축접합체액 10 ㎕에 접합체희석액 250 ㎕를 혼합하여 조제합니다.)

5) 기질액의 조제

사용하기 5-10분전에 기질액(7번병)과 기질용완충액(8번병)을 1:100의 비율로 혼합하여 사용합니다.(시험 시 1 스트립(8웰)당 기질액 10 ㎕에 기질용완충액 1.0 ㎖을 혼합하여 조제 합니다.)

혼합된 기질액은 직사광선을 피하여 보관합니다.

기질액은 냉장에서 얼어 있습니다. 반드시 따듯한 항온수조에서 완전히 녹여서 균질하게 한 후에 사용합니다.(기질액은 어는점이 18±1℃입니다.)

1) 시험에 필요한 양 만큼 스트립을 꺼내어 프레임에 고정시킵니다.

2) 농축접합체액(2번병)을 접합체희석액(3번병)으로 1:25의 비율로 필요한 양만큼 혼합하여 접합체액을 제조합니다.

3) 플레이트의 1A,1B,1C 웰에는 음성대조액(5번병)을 100 ㎕씩, 1D, 1E 웰에는 양성대조액(4번병)을 100 ㎕씩 차례대로 넣습니다.

나머지 각 웰에는 검체를 각각 100 ㎕씩 차례대로 넣습니다.

4) 2)번에서 조제한 접합체액을 각 웰에 25 ㎕씩 넣고 프레임을 가볍게 쳐서 잘 혼합한 다음 37±1℃항온기에서 90분간 반응시킵니다.

5) 4)번 반응이 끝나기 5-10분전에 기질액(7번병)을 기질용완충액(8번병)으로 1:100의 비율로 필요한 만큼 희석하여 기질액을 조제합니다.

6) 각 웰의 내용물을 흡입해 내고 세척액으로 5회 세척합니다. (각 웰당 300 ㎕이상, soak time 10-15초)

7) 세척된 플레이트를 흡습지에 뒤집어 쳐서 남아 있는 세척액을 완전히 제거한 다음 5)에서 조제한 기질액을 각 웰에 100 ㎕씩 넣고 프레임을 가볍게 쳐서 잘 혼합한 다음 실온에서 30±5분간 반응시킵니다.

8) 반응정지액(9번병)을 각 웰에 100 ㎕씩 넣고 반응을 정지시키고 잘 흔들어 양성반응 웰의 청색이 황색으로 완전히 변하게 합니다.

9) 흡광도 측정기를 사용하여 음성대조액, 양성대조액 및 검체의 흡광도를 측정합니다. 흡광도의 측정은 측정파장 450 nm에서 합니다. 참조파장을 사용 가능한 경우에는 620-690 nm로 합니다.

1) 음성대조액의 흡광도 평균값은 0.200 이하이어야 하며, 양성대조액의 흡광도 평균값은 0.800이상이어야 합니다.

2) 상기 기준에 접합하지 않을 경우에는 시약의 변질이나 실험기술상의 문제로 인한 것으로 생각되므로 그 원인을 확인하여 다시 시험합니다.

1) 음성대조액 흡광도 평균값에 0.05를 더한 값을 판정기준값으로 하고, 이 값 이상의 흡광도를 나타낸 검체는 양성으로 하며 그 미만의 검체는 음성으로 합니다.

예)

음성대조액 1의 흡광도값 0.020

음성대조액 2의 흡광도값 0.022

음성대조액 3의 흡광도값 0.021

음성대조액 흡광도값의 합 = 0.063

음성대조액 흡광도 평균값 = 0.063/3 = 0.021

판정기준값 = 0.021 + 0.05 = 0.071