에스디 에치.파이로리 항원 엘리자 (SD H.pylori Ag ELISA) - 의약품 상세정보

I. 검체 준비 및 저장방법

1. 검체의 준비

2. 검체의 저장방법

II. 검사 전 준비과정

1. 검체

2. 시약

III. 개봉 후 시약의 저장방법 및 사용기간

Ⅳ. 검사 방법

(1) 음성 대조액 (3 wells), 양성 대조액 (2 wells)과 분변추출액을 플레이트의 각 well에 100 ul 씩 넣는다.

(2) 시료가 분주된 플레이트의 각 well에 효소표지항체액을 25 ul 씩 분주하고 잘 혼합하여 밀봉테이프로 밀봉한 다음, 37±1℃ 항온기에서 60분간 반응시킨다.

(3) (2)의 반응이 진행되고 있는 사이 농축 세척액 (20배 농축액)을 정제수로 20배 희석하여 세척액을 제조한다. 세척액은 한 well 당 약 350 ul가 소요되며, 대조액 수 와 시료 수에 맞추어 준비한다. (예 : 증류수 950 ml에 농축세척액 50 ml을 첨가하여 제조한다.)

(4) (2)의 반응이 끝나면 각 well의 내용물을 흡입하여 버린 후, (4)에서 제조된 세척액을 well에 완전히 채우고 (well당 약 350 ul씩) 약 10초간 방치한 후, 용액을 흡입하여 버리는 과정을 5회 반복한다. 본 세척과정이 끝난 well 내에는 잔여 용액이 남지 않도록 완전히 제거한다.

(5) 기질액 A와 기질액 B를 1 : 1의 비율로 잘 섞어서 기질용액을 제조한다 (예 : 5 ml의 기질액 A와 5 ml의 기질액 B를 잘 섞어서 제조한다), 기질용액은 사용하고자 하는 well 당 100 ul가 소요되며, 대조액 수와 시료수에 맞추어 준비한다.

※ 기질용액은 제조 후 즉시 검사에 사용한다.

(6) 조제한 기질용액을 모든 well에 100 ul 씩 분주하고 첨부된 밀봉테이프로 밀봉하여 실온(15~30℃) 에서 10분 동안 반응시킨다.

(7) 반응 정지액을 모든 well에 100 ul 씩 넣고 잘 혼합한다.

(8) 공기를 맹검 (Air blank)으로 하여 음성 대조액, 양성 대조액 그리고 각 시료의 흡광도를 측정한다. 흡광도는 반응 정지액 주입 후, 30분 이내에 측정하며 흡광도의 측정 파장은 450 nm로 하고, 이중파장흡광도측정기 (dual wavelength reader)를 사용할 경우 참조파장은 620 nm로 하여 측정 한다.

V. 결과판정

(1) 판정 기준값 (Cut-off Value) 산출

ⓛ 음성 대조액 평균값 계산 : 상기 검사방법에 따라 3 well에서의 음성 대조액의 흡광도 값들을 얻은 후, 이들의 평균값을 산출한다.

예)

② 판정 기준값 계산

음성 대조액 평균흡광도 (NCx)값에 0.100 을 더하여 판정 기준값을 구한다.

예) 판정 기준값 = NCx + 0.100 = 0.047 + 0.100 = 0.147

③ 3개의 음성 대조액의 흡광도 값 각각은 0.100 이하여야하며, 각 음성대조액의 흡광도값은 평균 흡광도값의 0.47배 ~ 1.52배 범위에 있어야 한다. 만일 한 개의 값이 이 범위를 벗어나면 이를 버리고, 나머지 두 개의 값의 평균값을 평균흡광도 값(NCx)으로 한다, 두 개의 값이 이 범위를 벗어나면 시험 기술상의 문제나 시약의 변질로 인한 것으로 생각되므로 재시험을 실시해야 한다.

④ 양성 대조액의 흡광도 값은 모두 2.0 이상이여야하며, 각 양성 대조액의 흡광도 값은 평균 흡광도 값의 0.88배 ~ 1.12배 범위에 있어야 한다. 만약 이 기준에 적합하지 않을 경우에는 시험 기술상의 문제나 시약의 변질로 인한 것으로 생각되므로 그 원인을 확인하여 재시험을 실시한다.

(2) 판정

ⓛ 음성 : 판정 기준값 미만의 흡광도값을 나타내는 검체는 음성으로 판정한다.

② 양성 : 판정 기준값 이상의 흡광도값을 나타내는 검체는 양성으로 판정한다.

VI. 결과 판정시 주의사항

본 제제는 여러 가지 요인으로 인하여 위양성 또는 위음성 결과의 가능성을 완전히 배제할 수 없으므로, 본 제품의 결과만을 근거로 최종 진단을 해서는 안 되며 다른 검사 방법과 임상소견에 근거한 전문의의 판단에 의하여 최종 진단을 내려야 한다.