| 성상 | 시약 1,2를 포함한 투명바이알 2병과 시약3를 포함한 플라스틱 스트립, 배양용 덮개로 구성되어 있다. 1키트(25테스트용당) 1. 시약1(R1): 시약2(R2) 조제용 액체배지(수송배지), 25 × 3.1㎖ 바이알 미황색의 투명액이 든 백색뚜껑의 투명바이알 2. 시약2(R2): 동결건조품(배양배지), 25 × 1㎖ 바이알 주황색 동결건조품이 든 적색뚜껑의 투명바이알 3. 시약3(R3): 22가지 테스트용스트립 25개 건조된 생화학적 기질이 흡착된 22개의 웰을 가진 총 32웰의 플라스틱 스트립 4. 배양용덮개: 25개 |
|---|---|
| 업체명 | (주)비오메리으코리아 |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2009-12-02 |
| 품목기준코드 | 200908430 |
| 표준코드 | 8806593000104, 8806593000111 |
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비뇨생식기의 마이코플라즈마 진단 (마이코플라즈마의 배양, 동정, 세균수측정, 감수성 검사)
가. 측정원리
Mycoplasma IST 2는 선택배양배지와 22가지 테스트가 가능한 스트립으로 구성되어
있다. 배지는 마이코플라즈마를 위한 최적의 배양조건을 제공한다.(pH, 기질, 여러 가지 성장인자의 조합). 이 배지 중에는 특수기질 (U. urealyticum을 위한 urea, M. hominis를 위한 arginine)과 지시약(페놀레드)이 들어있기 때문에, 해당 미생물 존재 시 pH증가로 인해 색깔변화가 나타난다. 배지에 포함된 세 가지 항생물질과 한 가지 항진균물질 혼합물은, 검체에 존재할 수 있는 오염 세균총이 시험에 영향을 미치지 않도록 함으로써, 이 배지가 마이코플라즈마 선택성을 가지도록 해준다.
접종 후 배지액을 분주하는 스트립은 22가지의 테스트가 가능하며, 크게 다음 3가지
부분으로 나누어진다.
1) 동정
큐플1: 컨트롤( U.urealyticum 그리고/또는 M.hominis의 존재여부 확인:
지시약 함유로 미생물 성장시 색 변화 나타남 )
큐플2: U.urealyticum 동정 (M.hominis 에 대한 inhibitor존재로 Uu만 성장가능,
지시약 함유로 Uu성장시 색 변화 나타남)
큐플3: M.hominis 동정(U.urealyticum에 대한 inhibitor존재로 Mh만 성장가능,
지시약 함유로 Mh성장시 색 변화 나타남)
2) 반정량적 세균수 측정 (검체 중 세균수≥104 여부를 판별, 함유된 저해제의 량에도 불구하고 생존, 성장할 수 있는 경우에만 양성반응이 나타남.)
큐플4: U.urealyticum titer ≥104 CFU (colony forming unit) 판별
큐플5: M.hominis titer ≥104 CFU 판별
3)항생제 감수성 검사 (함유된 항생제 및 그 량에 대한 성장여부가 양성 및 음성으로 나타남)
큐플 6-22: 9가지 항생물질 및 역가에 대한 감수성 검사
나. 용법 및 용량
1. 검체의 채취 및 준비
1) 다음의 가검물이 검체로 사용된다: 요도가검물, 질내가검물, 정액(1/10희석), 기타 가검물(요)등이 시험될 수 있다.
2) 항생제 치료 전에 가검물을 채취한다.
3) 마이코플라즈마는 점액세포막에 높은 친화성을 가지므로, 가능한 많은 세포를 수집키 위해 점막을 확실히 닦아내는 것이 중요하다.
4) 기타 다른 미생물에 의한 오염을 방지하기 위한 표준화된 테크닉을 사용한다.
2. 검사방법
1) 가검물 채취 후, 스왑이나 액체가검물(200 uL)을 즉시 시약1 용액에 넣는다.
2) 아래표의 온도별 최대보관시간이내에, 접종된 시약1용액을 실험실로 가져간다.
| 온도 |
18-25 ℃ |
2-8 ℃ |
| 접종된시약1용액의 최대보관가능시간 |
5시간 |
48시간 |
위의 보관조건이 지켜지지 않았을 때, 잘못된 결과가 나올 수도 있다.
3) 혼합 후, 접종된 시약1용액 3 mL를 시약2 바이알 내에 옮긴다.
4) 동결 건조된 내용물이 완전히 용해될 때까지 vortex로 흔든다.
5) 스트립의 22큐플 각각에 배지액 55 uL씩 즉시 분주한다.
6) 각 큐플에 미네랄 오일 2적씩 떨어뜨린다.
7) 스트립 뚜껑을 덮는다.
8) 스트립 및 시약2의 남은 용액을 36±2 ℃에서 24시간 및 48시간 배양한다.
* 만일 스트립 내 분주가 즉시 이루어지지 않을 때, 가검물 접종된 시약1 + 시약2 배지는, 시약1 용액이 이미 보관된 적이 없는 경우에 한하여, 위 표의 조건만큼 보관될 수 있다.
3. 검사의 판독
1) 시약1 + 시약2 (urea-arginine Lyo2) 판독:24-48시간 배양후, 바이알에 배지 색깔 변화를 본다.
| 음성 |
양성(Uu and/or Mh) |
|
| 배지내 색변화 |
노란색 |
오렌지 내지 적색 Uu: 배지가 투명함. Mh: 약간흐린 배지 |
배지가 탁할 경우, 이 시험은 판독불가임.
2) 스트립 판독 : 4번 큐플은 24시간 배양 후 리딩하고, 기타 큐플은 24시간과 48시간 배양 후 리딩한다. 다음의 판독표에 따라 판독하고, 얻어진 결과들을 결과지에 기록한다.
| 큐플 |
리딩 |
양성 시 해석 |
||
| 양성 |
음성 |
|||
| 동정 |
0(컨트롤) |
오렌지-적색 |
황색 |
Uu and/or Mh존재 |
| Uu |
Uu 존재 |
|||
| Mh |
Mh 존재 |
|||
| 세균수 측정 |
Uu ≥ 104 |
적색 |
황색-오렌지 |
Uu ≥ 104 CFU/검체 |
| Mh ≥ 104 |
Mh ≥ 104 CFU/검체 |
|||
| 항생물질 감수성 검사 (mg/L) |
DOT 4 |
오렌지—적색 |
황색 |
시험균주는: - - 감수성 ( S ) + - 반감수성( I ) + + 저항성 ( R ) |
| DOT 8 |
||||
| JOS 2 |
||||
| JOS 8 |
||||
| OFL 1 |
||||
| OFL 4 |
||||
| ERY 1 |
||||
| ERY 4 |
||||
| TET 4 |
||||
| TET 8 |
||||
| CIP 1 |
||||
| CIP 2 |
||||
| AZI 0.12 |
||||
| AZI 4 |
||||
| CLA 1 |
||||
| CLA 4 |
||||
| PRI 2 |
오렌지-적색 |
황색 |
시험균주는: - 감수성 ( S ) +저항성 ( R ) |
|
• 만일 컨트롤 큐플이 음성(-)이면, 다른 큐플을 읽지 않는다.
• 만일 역가가 낮을 경우, 바이알에서만 색깔변화가 관찰되고 스트립의 컨트롤 큐플 에서는 색변화가 없을 수도 있다.(색변화를 일으키기에는 검체 내 미생물 역가가 너무 낮은 경우)
4. 시험방법의 한계
1) 48시간 배양 전에는 음성으로 판별할 수 없다.
2) 검체의 역가가 낮을 경우(Urea-arginine Lyo2 broth에서 양성이나) 스트립 큐플의 색변화가 없거나, 색변화가 기준과 일치하지 않을 수 있다.
3) 스트립에서 시행된 세균 수 측정은 단지 역가의 기준만 제시해준다. 정확한 세균 수는 아가(A7 Mycoplama agar)상에서 결정되어야 한다.
4) 검체내의 마이코플라즈마 역가는 고려되지 않은 채로, 항생제 감수성 검사가 시행된다. 테트라사이클린과 독시사이클린에서 접종물에 의한 영향이 관찰될 수 있다. 낮은 역가일 경우, 균주의 실제 감수성은 스트립에서 얻어진 결과와 다를 수 있다.
5) 항생제의 낮은 농도에서 음성이 나오고, 높은 농도에서 양성이 나오면, 이결과는 의미가 없다. 이런 경우, 재시험한다.
1) 체외 진단용으로만 사용할 것
2) 전문적 지식이 있는 자만 사용할 것
3) 감염성이 있는 것 취급 시 주의 상항을 지킬 것 (흡입이나 먹지 말 것)
4) 유효기간 경과된 시약 사용치말 것
5) 시약은 냉장고에서 꺼내 실온화 한 후 사용할 것
6) 바이알내용물이 혼탁할 경우, 오염가능성이 있으므로 사용치 말 것
7) 외관상 파손된 제품 사용치말 것
8) 사용설명서상의 시험과정을 변경, 수정할 경우 결과에 영향을 미칠 수 있다.
9) 시험결과는 환자 기록, 검체의 콜로니상, 현미경상, 형태학적인 내용들, 또 필요하다면, 기타 다른 시험, 특히 항생제 감수성 검사, 결과를 모두 고려할 수 있는 미생물학적 전문가가 해석할 것
10) 검사에 사용된 모든 스트립, 피펫 등은 반드시 고압멸균, 소각 또는 소독제 멸균 후 폐기할 것.
| 저장방법 | 기밀용기, 냉장(2∼8℃)보관 |
|---|---|
| 사용기간 | 제조일로부터 12개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 제조원 포장단위에 의함 |
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