바이오래드펀자이테스트 - 의약품 상세정보

FUNGITEST는 6개의 주요 항진균제에 대한 진균의 감수성을 검사하는 킷트이다. 각 웰에는 6개의 항진균제가 각각 2가지 농도로 들어 있다. 지시약(redox indicator)으로 resazurine이 들어 있으므로 진균이 자라면 배지의 색깔이 청색에서 분홍색(핑크색)으로 변하여 육안으로 관찰이 가능하다. 항진균제에 의해 진균의 성장이 억제되면 배지의 색깔은 청색이 그대로 남아 있다.

마이크로플레이트의 16개의 웰의 분포는 다음과 같다. :

ㆍ 양성 대조 웰 (진균이 잘 자람) : 2개

ㆍ 항진균제(6가지 항진균제 Х 2가지 농도)가 들어 있는 웰 : 12개

ㆍ 음성 대조 웰(3가지의 항진균제가 들어 있어 진균이 자라지 않음) : 2개

총16개의 웰(well)

검사하고자 하는 균주는 이 킷트에 포함되어 있는 "현탁 배지"를 이용하여 희석한 후 마이크로플레이트에 접종한다.

각 웰에 들어 있는 배지는 "현탁 배지"를 접종하면 재수화된다.

(1) 진균 현탁액 준비

1) Sabouraud 배지에서 배양한 것으로부터 피펫을 이용하여 2개의 비슷한 집락(colonies)을 채취한 후, 3mL의 멸균 증류수에 넣어 1차 접종액(calibrated inoculum)을 만든다. : Mac Farland No.1 standard, 즉 ≈3 Х 10⁶ yeasts/mL

2) 정량 피펫을 이용하여 1차 접종액 100μL를 취하여 1.9mL의 멸균 증류수에 섞는다.

3) 2)항에서 희석한 접종액 20μL를 킷트에 들어있는 "현탁 배지"에 접종한다. 따라서, 최종 접종액의 농도는 ≈1 Х 10³ yeasts/mL이 된다.

(2) 마이크로플레이트에 접종

1) 정량 피펫을 이용하여 "현탁 배지"에 희석한 최종 접종액 100μL를 취하여 마이크로플레이트의 각 웰에 접종한다.

2) 마이크로플레이트를 부착 필름으로 덮는다.

(3) 마이크로플레이트의 배양

ㆍ 32℃에서 72시간 배양 : Cryptococcus neoformans 인 경우

ㆍ 37℃에서 48시간 배양 : 기타 다른 진균인 경우

(4) 결과의 해석 및 판정

ㆍ 양성 대조 웰(T+)이 분홍색(핑크색)인 경우에만 플레이트 검사를 실시한다.

ㆍ 항진균제가 들어 있는 웰에서의 어떠한 색상 변화는 반드시 음성 대조 웰(청색)의 색깔과 비교하여 관찰한다.

ㆍ 각 항진균제에 대한 2개의 웰의 색상은 다음과 같이 해석한다.

- 청색-청색 : 진균이 자라지 않음 : in-vitro에서 항진균제에 의해 진균의 성장이 억제됨.

- 분홍색-청색 : 진균이 적게 자람(low growth) : 중간 정도의 감수성을 지닌 진균

- 분홍색-분홍색 : 진균이 자람: in-vitro에서 항진균제에 의해 진균의 성장이 저해되지 않음.

이 킷트의 성능은 다음의 균주를 사용하여 확인할 수 있다. :

^*: 32℃에서 72시간 배양