세로디아에이엠씨(Serodia AMC) - 의약품 상세정보

Serodia AMC는 젤라틴을 입자화한 인공담체에 사람의 갑상선 조직으로부터 추출, 정제한 마이크로좀 항원을 감작시킨 것으로 간접응집법에 의하여 인 혈청중의 항마이크로좀가를 측정하여 갑상선 자기항체에 의한 각종 갑상선질환을 진단하는 시약이다.

① 감도, 특이도, 역가에 있어서 종래의 마이크로법과 거의 같다.

② 담체에 의한 비특이 응집을 제거하기 위해 혈구대신 새로 개발한 인공담체를 사용하고 있다.

③ 착색시킨 인공담체를 이용하므로 혈구에 비해서 응집상이 선명하여 판정이 용이하다.

④ 본 시약은 3시간 후에 판정하지만 다음날 판정해도 응집상이 변하지 않는다.

검체의 준비 : 피검혈청에 적혈구 및 다른 유형성분이 포함되어 있으면 반응에 지장을 초래하므로 원심분리 후 검사한다. 피검혈청의 불활성화는 시키지 않아도 무방하다.

① U형 마이크로플레이트(8x12well)를 가로로 사용하여 1검체당 1열(12well)을 이용한다.

② 혈청희석용액을 dropper로 제 1well과 제 2well에 50㎕(2방울)씩, 제 3well에서 최종 well까지 75㎕(3방울)씩 적하한다.

③ 마이크로파이펫으로 피검혈청을 10㎕ 취해서 제 1well에 넣는다.

④ 제 1well에 diluter를 넣고 최종 well까지 4ⁿ 희석을 실시한다.

⑤ 첨부한 dropper로 미감작입자를 제 2well에 25㎕(1방울), 감작입자를 제 3well에서 최종well까지 25㎕(1방울)씩 적하한다.

⑥ 플레이트를 tray mixer에 걸어 내용물을 충분히 혼합한 후 유리판이나 다른 플레이트 등으로 뚜껑을 하고 실온(15-30℃)에 수평으로 정치하고 판정을 3시간 후 viewer 위에서 반응상을 관찰, 기록한다. 또한 다음날까지 정치한 후 판정해도 무방하다.

▶ 대조시험

① 각 검체마다 실시한 피검혈청과 미감작입자와의 반응(최종희석배수 1:27)이 음성인지를 확인한다.

② 검사마다 혈청희석용액과 감작입자 및 미감작입자가 음성인지를 확인한다(medium대조).

③ 1 kit마다 대조용 양성혈청시험을 함께 실시한다.

측정조작법과 동일한 방법으로 대조용 양성혈청에 대해 시험한다. 이 때 항체가는 1:1600(+)이다.

표 1. 10㎕ micropipette 사용방법

표 2. micropipette을 사용하지 않는 방법

① 이 시험은 인공입자를 담체로 하여 사용하므로 종래의 혈구응집반응의 반응상과는 다소 다르다. 미감작입자, medium 대조, 음성혈청과 양성혈청의 음성부분의 반응상은 입자가 well 중앙에 침강하여 밀집된 단추모양이 된다.

② 단추모양이 넓게 막을 형성하고 있으면 양성이고, 양성의 정도에 따라 표 3과 같이 반응상을 관찰한다.

③ 반응상의 판정은 medium 대조와 비교해서 표 3의 판정기준에 의해 판정한다. 또한 팜플렛 등의 사진을 참조한다.

미감작입자가 음성(최종희석배수 1:27)이고, 감작입자(최종희석배수 1:100 이상)가 응집을 나타내는 것을 양성으로 하고 양성을 표시한 최종희석배소를 가지고 항체역가로 한다.

미감작입자에 응집을 나타내는 것ㄴ은 거의 없지만 미감작입자에 양성을 나타내고 감작입자에도 양성을 나타내는 혈청에 대해서는 다음의 순서에 따라 흡수조작을 시행하고 재시험을 한다.

① 소시험관에 복원한 미감작입자를 250㎕ 넣는다.

② 피검혈청 50㎕를 가해서 튜브믹서로 잘 혼합하고 실온에 30분간 방치한다. (도중 1~2회 혼합)

③ 2000rpm에서 5분간 원심분리한 후 상청(흡수제 1:6 희석혈청)을 제 1well에 50㎕(2방울)를 취하여 넣는다. 혈청희서용액 50㎕(2방울)을 제 2well에, 제 3well에서 최종 well까지는 75㎕(3방울)씩 적하한다. 이어서 다이루터를 제 1well에 넣어서 최종 well까지 4n 희석을 실시한다.

④ 미감작입자를 제 2well에, 감작입자를 제 3well에 최종 well까지 25㎕(1방울)씩 적하한다.

⑤ 이하 본시험과 동일한 조작을 하여 판정한다.

① 마이크로플레이트의 내용물을 충분히 혼합한다.

② 반응정치 중에는 마이크로플레이트에 반드시 뚜껑을 하고 진동을 가하지 않는다.

③ 마이크로플레이트의 세척은 이 반응을 좌우하는 중요한 요소이므로 각별히 주의하여 세척한다. 세척방법은 수돗물로 충분히 씻은 후 중성세제에 하루 동안 담가둔다. 다음날 수돗물로 세제를 충분히 씻은 후 최종적으로 정제수로 헹구고 37℃ 이하의 항온기나 공기 중에서 건조시킨다. 마이크로플레이트의 세척이 불충분한 경우 이상응집, 침강불량 등에 의하여 판정과오의 원인이 되므로 주의한다.

④ 다이루터는 1일 1회 사용 전에 가스버너의 불꽃 속에서 5~10초간 달구어서 냉각하고 선단을 생리식염수나 증류수에 담가둔다. 시험이 완료된 후에는 물에 담가 헹구고 증류수로 세척하여 건조시킨다.

⑤ kit내의 시약은 정확한 반응상이 얻어지도록 조합되어 있으므로 제조번호가 다른 시약을 조합하여 사용하지 않는다.

⑥ 피검혈청중에는 HBs 항원이 존재할 가능성이 있으므로 주의한다.

⑦ 임상검사외 사용을 금한다.

냉암소(2~10℃)보존으로 1년간 유효