세로디아 마이코 투(II)(Serodia-Myco II) - 의약품 상세정보

Serodia-Myco II는 젤라틴을 입자화한 인공담체를 Mycoplasma Pneumoniae(Mac주)의 세포막 성분에 감작시킨 것으로 혈청검체중 항 마이코플라스마 항체가 존재할 경우 감작입자와 간접 응집반응을 유발하여 감염을 진단하는 원리이다.

(1) 종래의 보체결합반응에 비해, 조작이 매우 간단하다.

(2) 담체에 유래하는 비특이 응집을 가능한 한 제거하기 위해서 혈구 대신 새롭게 개발한 인공담체를 사용하고 있다.

(3) 착색시킨 인공담체를 사용함으로써, 혈구에 비해서 응집상이 명료하므로 판정이 용이하다.

(4) 본 시약은 3시간 후에 판정하지만, 다음날 판정해도 응집상이 변하지 않는다.

(1) 검체의 준비

피검혈청에 적혈구, 기타 유형성분이 함유되어 있을 때는 원심침전 하에 제거한다.

시험하기 전 56℃에서 30분간 혈청을 비동화 시킨다.

(2) 시약의 조제

감작입자. 미감작입자는 사용 30분전에 혈청희석용액을 소정량 가하여 복원한다.

(1) Microplate에 혈청희석용액을 Dropper로 제 1Well에 100㎕(4방울), 제2Well - 최종Well(제8Well이상)까지는 25㎕(1방울)씩 적하한다.

(2) 다음에 Micropipet으로 피검혈청을 25㎕취하여 제1Well에 분주한다.

(3) 제 1Well로부터 최종 Well까지 피검혈청을 2배 연속 희석한다. 첨부의 스포이드로 미감작입자를 제2Well에 1방울(25㎕), 감작입자를 제3Well이하 최종 Well까지 1방울(25㎕)씩 적하한다.

(4) Microplate를 Tray Mixer에 장치하여 내용물을 잘 혼합한 후, 유리판이나 빈 플레이트 등으로 뚜껑을 하여 상온(15-30℃)에서 수평으로 정치하고 3시간 후에 판정한다.

표1 시험조작법

주) Micropipet을 사용하지 않을 경우

피검혈청을 Diluter로 정확히 25㎕ 취하여, 이 diluter를 사용하여 제 1 Well로부터 희석하거나, 혈청희석용액을 제 2 Well이하 최종 Well까지 25㎕(1방울)씩 적하하고, 다른 방법으로 만든 1:5희석혈청을 diluter로 제 2 Well에 취하여 희석하는 방법이다. (이하 표1에 준함)

* 대조시험

(1) 각 검사 시 마다 피검혈청과 미감작입자와의 반응이(1:20)음성인 것을 확인한다.(피검혈청대조)

(2) 각 검사 시 마다 혈청희석용액과 반응시킨 감작입자와 미감작입자 양쪽 모두 음성인 것을 확인한다.(시약대조)

(3) 1 Kit마다 첨부한 양성대조혈청 (1:10 희석됨)에 관한 대조시험으로, 우선 제 3 Well부터 최종 Well까지 혈청희석용액을 25㎕(1방울)씩 적하하고, 다음에 제 2Well에 양성대조혈청을 50㎕(2방울)분주하여 희석, 혼합, 반응 판정을 시험조작법에 준하여 시험한다. 양성대조혈청의 항체가는 1:320(+)이다.

표2. 대조시험

판정용 Viewer(간접투과광선이용)위에 Micrplate를 살며시 놓고 입자의 응집반응상을 육안으로 판정한다. 응집반응판독은 시약대조 반응상과 대비하여 표 3의 판정기준에 따라 판정한다.

표3 판정기준

검체가 미감작입자와의 반응(최종희석배수 1:20)에서 음성이고 감작입자와의 반응(최종희석배수 1:40이상)에서 응집을 나타내는 것을 양성으로 하며, 양성을 나타낸 최종희석배수를 항체가로 한다.

미감작입자와 반응에 양성을 나타내고, 감작입자와 반응에도 양성을 나타낸 혈청에 대해서는 다음 순서에 따라 흡수조작을 한 후에 재시험을 실시한다.

(1) 소시험관(원침관등)에 소정량의 혈청희석용액으로 복원한 미감작입자를 450㎕넣는다.

(2) 피검혈청을 50㎕ 가하여 잘 혼합하고, 실온에서 30분간 방치한다. (도중에 1-2회 잘 흔들어 섞는다.)

(3) 2,000rpm에서 5분간 원심 분리하여 상청(흡수완료 1:10 희석혈청)을 50㎕ 취하고 1 Well에 분주하고 제 2 Well 이후 최종 Well까지 25㎕(1방울)씩 적하한 후, 제 1 Well로부터 diluter를 이용하여 2배 연속희석을 실시한다.

(4) 미감작입자를 제 1 Well에, 감작입자를 제 2 Well 이하 Well에 1방울씩 적하한다.

(5) 이하 본 시험과 동일 조작을 하여 판정한다.