비티에이스탯테스트BTAstatⓡTest - 의약품 상세정보

BTA stat Test는 방광암 환자의 뇨중의 방광암 항원을 정성 측정하는 체외 진단용 시약이다.

이 검사는 방광암 환자의 진단과 관리의 보조로 사용된다.

방광암:

방광암은 유럽에서 남자의 경우 5번째로 높은 빈도의 암이며 여자의 경우에는 11번째로 높다. 평균 발생률은 약 100,000명 중 19명이다. 유럽과 마찬가지로 방광암은 미국에서는 남자의 경우 4번째, 여자의 경우 9번째로 발생빈도가 높다. 이 환자의 약 75-80%의 환자가 방광의 표제성 점막으로 한정되는 전이세포암종(transition cell carcinoma:TCC)를 가지고 있다. 이 환자들의 재발 가능성은 약 75%정도이다. 대개 사전에 방광암 진단을 받은 환자들은 뇨세포학이나 방광경을 이용하여 재발 가능성을 확인하였다. 두 방법 모두 각각 한계가 있다.

방광경은 생체검사를 하지 않은 경우 민감도와 특이도 면에서 진단의 표준으로 여겨지고 있다. 이 방법은 환자의 입장에서 불편하고 가격이 비싸고 이 시각화 할 수 있는 암들을 진단하는데 한계가 있다.

배뇨 세포학(Voided urine cytology: VUC), 또는 뇨 침전물의 측정법의 종양검사는 최적의 결과에 도움이 되는 몇 가지 요인이 있다. 요로상피세포는 복제를 위해서 약 1년이 필요하다. 따라서 소량의 특정 검체만이 가능하다. 표피를 벗겨낸 세포는 진단을 방해하는 고농도의 산성과 낮은 삼투압의 부적당한 환경에 놓인다. 검체 수집, 보관, 처리, 해석의 기준은 표준화되어 있지 않다. 모니터의 한 방법으로 그동안의 세포학에서는 조기 암에서 낮은 민감도를 보이는 것 같이 암의 상태와 단계에 따라 여러 가지 결과가 나타났다. 이에 더하여 최상의 결과는 특이 배설 과정하에 수집된 검체의 검사로 얻어졌다.

방광암을 가지고 있는 환자의 진단과 관리는 환자 앞에서 즉석으로 또는 실험실에서 행할 수 있는 빠르고 간단한 뇨검사로 발전되었다. 최근의 연구는 이런 면에서 BTA stat test가 가장 유용하다는 것을 보여 주었다. BTA stat test는 뇨중의 방광암 항원을 정성적으로 검사하며, One-Step으로, 뇨검체의 사전처리 없이 단 5분만에 검사할 수 있는 항체를 기초로 한 시약이다.

방광암 항원

BTA stat test에 사용된 단클론 항체는 조직학적으로 양성인 방광암 환자의 뇨 성분에 의해 만들어 졌다. 방광암 항원은 인간 보체 인자 H(hCFH)와 구성성분, 구조, 기능이 비슷한 인간 보체 인자 H 관련 단백질(hCFHrp)로 밝혀졌다. hCFH 또한 BTA stat test에서 이용한 단클론 항체로 인식된다. 세포배양에서 hCFHrp는 몇 종의 사람 방광암 세포에서 만들어지며, 정상적인 상피조직의 세포에서는 만들어지지 않는다.

hCFH는 호스트에 외부물질로 인식된 세포를 용해하는 기능을 하는 부보체경로(alternative complement pathway)의 조절에서 중요한 억제역할을 한다. 보체 인자 C3b와의 반응으로 인하여 hCFH는 막공격복합체의 형성을 억제하여, 세포의 용해를 방해한다. 체외에서, 방광암 항원은 보체경로를 방해하여 보체에 의한 세포 용해를 막는다. 방광암 항원의 생성은 in vivo에서 인체의 면역 조직을 피할 수 있게 하여 암세포의 선택적인 성장에 이점을 준다.

BTA stat test는 뇨중의 방광암 항원의 존재를 특이적으로 측정하는 단클론 항체를 사용한 면역 크로마토그래피법 시약으로 방광암을 신속하게 검사할 수 있다. 환자의 뇨를 샘플 웰에 첨가하고 콜로이달 골드-콘쥬게이트 항체와 반응하도록 한다. 만약, 항원이 검체안에 있으면 항원-콘쥬게이트 복합체를 형성한다. 반응 복합체는 항체가 고정된 멤브레인을 따라 흐르게 된다. 환자 검체 반응부분(P)에서 항원-콘쥬게이트 복합체는 포획 항체와 반응하여 눈에 보이는 선이 생기게 된다. 환자의 뇨에 항원이 없는 경우에는 선이 보이지 않게 된다. 콘트롤 부분(√)은 항원의 유무와는 독립적으로 콘쥬게이트를 포획하는 고정 시약을 포함하고 있으므로 항상 선이 생긴다.

이 콘트롤은 각 디바이스가 제대로 실험되었는지를 실험자에게 확인시켜준다.

BTA stat test 킷트는 2-30℃에서 보관해야 한다. 이 테스트 킷트는 이 온도에서 박스에 표시되어 있는 날짜까지 안정하다.

BTA stat test를 위해서 환자의 배뇨 또는 뇨가 필요하다. 방광 바르보타지 검체, 혈청, 혈장, 전혈은 사용할 수 없다. 뇨는 방부제나 고착제가 없는 깨끗한 소변컵에 수집하고 라벨을 붙인다. 만약 뇨가 다른 실험을 위해 사용된다면 오염을 방지하기 위해 최소 2ml정도를 따로 보관한다. 테스트하기 전에 뇨를 잘 섞는다. 뇨 검체는 수집 후 48시간까지 보관이 가능하다. 만약 검체를 48시간 이내에 검사하지 않을 경우, 2-8℃에서 7일까지 냉장보관이 가능하다. 만약 샘플을 7일 이내에 검사하지 않으면, 검사할 때까지 -20℃이하에서 보관해야 한다. 냉동검체는 무기한 보관할 수 있다. 냉동과 용해를 반복하지 않도록 한다.

‧ 종이컵이나 발포성 용기는 뇨 검체의 수집이나 보관을 위해 사용하지 않는다.

‧ 방사선 치료나 전신 화학치료가 BTA stat test에 미치는 영향은 아직 밝혀지지 않았다.

‧ BCG, mitomycin C, Thiotepa, bropiramine(investigational), interferon(investigational) 같은 방광 치료를 받은 환자는 의사의 판단하에 검사되어야 한다.

‧ 실험용 약에 의한 영향은 아직 밝혀지지 않았다.

‧ 담석이나 신장염 같은 신장 질환자나 신장암 환자는 BTA stat test에서 양성이 나타날 수 있다.

‧ 수술이나 생검검사에 의한 방광 혹은 뇨기관의 외상은 이 검사전에 충분한 시간을 두고 치료되어야 한다.

BTA stat 10-Test Kit(Cat.No.661010) 구성물질

‧ 10개 호일 팩. 각각의 팩 내용물은

1 BTA stat test Device. 각 디바이스는 아지드화 나트륨을 함유한 단백질 매트릭스에 포획 항체와 콘쥬게이트 된 항체가 있다.

1 일회용 드로퍼

1 흡습제

‧ 설명서

BTA stat 24-Test Kit(Cat.No.661024) 구성물질

‧ 24개 호일 팩. 각각의 팩 내용물은

1 BTA stat test Device. 각 디바이스는 아지드화 나트륨을 함유한 단백질 매트릭스에 포획 항체와 콘쥬게이트 된 항체가 있다.

1개의 일회용 드로퍼

1개의 흡습제

‧ 설명서

‧ 타이머

‧ 소변 수집 용기

1) 테스트 시약을 준비하고 뇨 검체를 실온이 되게 한다. 환자의 뇨 검체를 잘 섞어준다.

2) 호일 팩에서 디바이스와 드로퍼를 꺼낸다. 건조제는 버린다. 디바이스를 평평하고 깨끗한 바닥에 놓고 환자명을 표기한다.

3) 타이머를 맞춘다. 드로퍼에 뇨 검체를 채우고 그림과 같이 샘플 웰 위에 수직으로 세워 놓는다.

4) 공기방울 없이 검체 5방울을 샘플 웰에 분주하고 타이머를 시작한다. 드로퍼는 버린다.

5) 타이머가 5분이 되면 1분 안에 결과를 읽는다. 결과는 다음의 “결과 해석”에 따라 판정한다.

1) 양성 결과: 신중하게 환자 검체 반응부분(P)의 창을 본다. 색의 진하기와 상관없이 어떠한 분홍색이나 적갈색의 선이 나타나면 결과는 양성이다.

2) 음성 결과: 신중하게 환자 검체 반응부분(P)의 창을 본다. 환자 검체 반응부분(P)의 창에 선이 나타나지 않으면 결과는 음성이다.

3) 무효 결과: 만약 실험 콘트롤 부분(√)의 창에 선이 나타나지 않으면, 이 테스트는 무효이므로 새 킷트로 다시 실험해야 한다. 대부분 무효 결과가 나타나 는 경우는 정확히 5방울을 분주하지 않은 경우가 많다.

GLP(Good Laboratories Practices)는 적정한 콘트롤의 사용을 추천한다.

BTA stat test의 결과는 방광암의 TCC(Transition Cell Carsinoma)의 존재에 대한 절대적인 증거로 판단되어서는 안된다. 담석, 신장염, 신장암, 방관이나 뇨기관의 최근 외상환자에서 증가된 방광암 항원을 나타내었다.

BTA stat test에 의한 결과는 환자의 임상적 증거와 다른 진단에서 얻을 수 있는 정보와 함께 사용되어야 한다.

임상 특이성

BTA stat test 특이성은 방광암의 병력이 없는 555개의 샘플을 이용하여 실험하였다. 검체는 여러 지역에서 수집되었고 검사까지 냉동상태에서 보관되었다. 평균연령은 55세이고 48%가 남성이었다. 정상 건강군은 흡연자와 비흡연자로 구성된다. 비-비뇨생식기 질환은 당뇨병, 관절염, 루프스와 다른 콜라겐 퇴행성 질환을 포함하며, 악성종양은 유방, 폐, 소화기 종양, 백혈병, 림프육종을 포함한다. 비-방광 비뇨생식기암종은 전립선, 신장 세포, 자궁내막, 난소와 다른 비뇨생식기 암을 포함한다. 비뇨생식기(GU) 질환 분류는 전립선염, 요도염, 담석증, 뇨관 감염증(UTI), 실금, 성교 감염증(STD)과 그밖의 질병으로 이루어져 있다.

GU 질병과 악성종양을 갖지 않은 건강한 개체에서 BTA stat test의 음성률은 95%와 93%이었다. 양성 BTA stat test결과는 담석증, 신장염과 같은 신장 질환을 가지고 있는 환자와 상부뇨관 TCC를 포함한 신장암 환자의 경우에 일어날 수 있다.

방광암의 병력이 있지만 질환의 증거가 없는 107명의 환자의 BTA stat test 특이성은 70%이었다.

결과는 테스트 된 환자의 지역에 따라 배우 다르게 나타날 수 있다.

Table 1. BTA stat TEST CLINICAL SPECIFICITY RESULTS

임상 민감도

BTA stat test 민감도는 생검으로 방광암으로 판명된 환자 220명의 뇨 검체를 사용하여 분석하였다. 샘플은 여러 지역으로부터 수집되어 검사 전까지 냉동보관 하였다. 환자의 평균 연령은 68세이고 79%가 남자이다. 결과는 암의 단계와 정도에 따라 다음과 같이 나타났다.

Table 2. BTA stat TEST SENSITIVITY BY STAGE AND GRADE*

*3 patients without stage and 12 without grade determinations.

131명의 검체는 BTA stat test에 사용한 같은 검체로 배뇨세포학적(voided urine cytology;VUC) 검사를 하였다. BTA stat test는 Tis를 제외한 모든 경우에서 VUC보다 민감도가 높다.

Table 3. BTA stat TEST AND VUC SENSITIVITIES

훅크 현상

훅크(프로존)현상 테스트는 BTA stat test가 높은 농도의 양성 환자 검체로부터 장애가 없는지 확인하기 위한 실험이다. 이 실험의 결과로 환자 뇨 검체에서 방광암항원의 농도 12,400U/mL까지 프로존 현상이 나타나지 않았고, 이 농도가 테스트 가능한 가장 높은 농도이다.

재현성

내부 측정 재현성 검사는 2 롯트의 BTA stat 디바이스로 했으며, 롯트간의 재현성은 3가지 로트의 BTA stat 디바이스에 4가지 농도를 알 수 없는 검체로 매일 10번 반복하여 5일간 검사하여 각 결과는 3개의 reader를 사용하였다. 이 테스트의 결과는 다음의 표 4에 나타나 있다.

Table 4. REPRODUCIBILITY OF THE BTA stat TEST

*하루에 10개씩, 5일 동안

샘플 C는 BTA stat test 측정 한계에 가까운 양의 방광암 항원을 가지고있다.

측정 최저치

측정 가능한 최저치는 22.4U/mL이다.

보통과 TCC 양성 뇨샘플은 BTA stat test에서 다음과 같은 물질을 함유하고 있다. 이 물질들은 다음의 양에서 BTA stat test에 영향을 주지 않는다.