에이피아이20이 - 의약품 상세정보

API 20 E 스트립은 건조된 생화학적 기질이 들어있는 20개의 작은 튜브로 구성되어 있다. 접종될 균부유액은 튜브 내부의 기질을 현탁시킨다. 배양후 균의 성장에 따른 대사작용과 대사물의 생화학적 반응의 결과를 판독하여 결과지에 기록한다. Analytical Profile Index 또는 동정프로그램을 사용하여 7자리 숫자에 상응하는 데이터베이스 상의 미생물을 찾는다.

1. 스트립의 준비

가. 키트와 함께 제공되는 트레이와 뚜껑을 준비하고 충분한 습도를 유지하기 위해 트레이에 증류수 또는 탈이온수 5ml 를 붓는다.

나. 트레이에 검체 번호를 기록하고 스트립을 트레이에 넣는다.

2. 균액의 준비

가. 분리 배지에서 잘 배양된 집락 한개를 멸균된 피펫으로 따서Suspension Medium(5 mL) 또는 멸균증류수(5 mL) 에 현탁한다. 동정하고자 하는 검체가 비브리오라고 추정될 경우는 생리식염수에 현탁한다.

나. 다음의 옥시다제 검사를 한다.

필터페이퍼 또는 슬라이드 글라스에 물 한방울을 떨어뜨려 적신 후, 멸균적인 방법으로 집락을 따서 문질러 바르고 옥시다제 시약(OX) 한방울을 떨어뜨려 1~2분내에 진한 청색이 되면 양성 반응이다.

3. 스트립의 접종

가. 균액 조제에 사용했던 멸균된 피펫으로 스트립에 표시되어 있는 CIT VP GEL 웰에는 튜브(:방의 아랫 부분)와 큐풀(:방의 윗 부분) 까지 준비된 균액을 채우고, 나머지 다른 웰은 튜브 까지만 채운다.

나. 균액을 채운뒤 ADH, LDC, ODC, H₂S, URE 방은 혐기 상태를 유지하기 위하여 광유로 큐풀 부분을 채운다.

다. 트레이의 뚜껑을 덮고 35~37℃에서 18~24시간 배양한다.

4. 스트립의 판독

가. 배양이 끝난 후, 키트와 함께 제공되는 사용설명서의 판독표에 따라 결과를 판정하여 결과지에 기록한다. 글루코즈(GLU)의 반응이 양성 또는 양성결과가 3개 이상이면 다음의 검사를 계속한다.

● TDA 검사 : TDA 시약 한방울을 떨어뜨려 어두운 갈색이면 양성이다.

● IND 검사 : JAMES 시약 한방울을 떨어뜨려 즉시 전체가 핑크색으로 변하면 양성이다. 또는 IND 시약을 한방울 떨어뜨리고 2분후 적색링이 생기면 양성이다.

● VP 검사 : VP1, VP2 시약을 각각 한방울씩 떨어뜨려 10분 후 옅은 핑크 또는 적색이면 양성이다.

● NO₂ 검사 : NIT1, NIT2 시약을 GLU 튜브에 각각 한방울씩 떨어뜨려 2~3분후 적색이면 양성이다. 음성임을 확인하기 위하여 2~3mg의 아연 분말을 GLU 웰에 추가하고 5분뒤 적색이면 양성, 변화 없으면 음성이다.

나. 만약 글루코즈(GLU) 반응이 음성이고 양성 결과가 2개 이하이면 시약을 넣지 말고 다음을 따른다.

● 글루코즈 대사를 확인하기 위하여 2개의 API OF medium에 접종한다.

● 막콘키배지에 접종한다.

● API M medium에 접종하거나 현미경으로 관찰하여 운동성을 확인한다.

● 24시간 재배양 후 상기의 시약을 넣은 후의 결과와 추가검사 결과를 판독표에 따라 판정하여 결과지에 기록한다.

5. 동정

가. 결과지에는 시험종목이 3개씩 묶어 한 그룹으로 되어 있고 각 그룹마다 차례로 1,2,4의 숫자가 적혀있다. 각 그룹의 반응에서 양성결과에 대응하는 숫자만 더하면, 스트립상의 20개 검사와 옥시다제 검사에 대해 7자리의 아라비아 숫자가 구해진다.

예)

나. Analytical Profile Index에서 7자리 숫자 결과에 상응하는 미생물을 찾거나 동정프로그램을 사용하는 경우 7자리 숫자 결과를 키보드로 입력한다.

다. 7자리 숫자로 동정이 불충분할 경우 다음의 추가검사를수행한다.

● 질산염 환원시험(NO₂,N₂)

● 운동성(MOB) 유무

● 맥콘키배지 성상(McC)

● 글루코즈의 산화(OF-O)

● 글루코즈의 발효(OF-F)

라. 추가검사와 판정방법은 Analytical Profile Index 및 동정프로그램에 지시되어있다.