에이피아이리스테리아 - 의약품 상세정보

API Listeria 스트립은 건조된 기질이 들어있는 10개의 작은 웰로 구성되어 있으며 효소반응 , 당발효반응 및 생화학적 검사가 수행된다.

35~37 ℃, 18-24시간 배양 후 균의 성장에 따른 반응색 또는 보조시약첨가후의 발색을 판독하여 결과지에 기록한다. 키트와 함께 제공되는 사용설명서 또는 동정 프로그램을 사용하여 데이터베이스 상의 미생물을 찾는다.

1. 집락의 선택

검사할 집락이 리스테리아속인지 확인한다.(그람양성 단간균,-- 다형태성, 25℃에서 운동성있고 37℃에서 운동성 없슴, 카탈라제 양성, 옥시다제 음성)

리스테리아속끼리 섞여 자라는 경우가 있으므로 잘 분리된 집락을 혈액 한천 배지에 순수 배양해야 한다.

2. 스트립의 준비

가. 키트와 함께 제공되는 트레이와 뚜껑을 준비하고 충분한 습도 유지를 위해 트레이에 증류수 또는 탈이온수 5ml를 붓는다.

나. 트레이 끝에 검체 번호를 기록하고 스트립을 트레이에 넣는다.

3. 균액의 준비

가. 키트와 함께 제공되는 Suspension Medium(2ml)에 잘 배양된 집락을 멸균된 피펫을 사용하여 적당량 부유시켜 표준탁도 1 McFarland 로 한다.

나. 용혈성을 관찰하여 결과지에 기록한다.

4. 균액의 접종

가. 잘 혼합된 균액을 멸균 피펫으로 기포가 생기지 않도록 주의하며 스트립에 분주한다. 이때 접종액이 넘치거나 부족하지 않도록 주의한다.

- 첫번째 웰( DIM ): McFarland로 맞춰진 액을 튜브와 큐풀에 분주하며(약 100㎕), 위로 불룩해지지 않도록 주의한다.

- 나머지 웰( ESC 에서 TAG 까지) : 2번째 Suspension Medium을 이용하여 접종액을 0.5 McFarland 되도록 희석하여, 각 튜브 부분에만 분주한다(약 50㎕).

나. 트레이의 뚜껑을 덮고 35-37℃ 에서 18-24시간 배양한다.

다. 웰에 접종액이 넘치거나 모자라면 위양성 또는 위음성 결과를 얻을 수 있다.

5. 스트립의 판독

가. DIM 웰에 ZYM B 시약을 한 방울 떨어뜨리고 3분 후 판독하여 기록한다.

나. <API Listeria판독표> 에 의해 나머지 웰의 판독결과 및 용혈성 유무를 결과지에 기록한다.

6. 동정

가. 결과지에는 시험종목이 3개씩 묶어 한 그룹으로 되어 있고 각 그룹마다 차례로 1,2,4의 숫자가 적혀있다. 각 그룹의 반응에서 양성결과에 대응하는 숫자만 더하면, 스트립상의 10개 검사에 대해 4자리의 숫자가 구해진다.

예)

6 510 Listeria monocytogenes

나. 4자리 숫자 결과를 사용설명서에서 찾아보거나 동정프로그램상에서 키보드로 입력한다.

<에이피아이 리스테리아 (API Listeria) 판독표>