에이피아이20에이 - 의약품 상세정보

API 20 A 스트립은 건조된 생화학적 기질이 들어있는 20개의 작은 웰로 구성되어 있다. 접종된 균액은 튜브 내부의 기질을 현탁시킨다. 35-37℃, 24-48시간 배양 후, 생성된 대사산물이 pH 지시약 또는 보조시약과 반응한 결과를 판독하여 결과지에 기록한다. Analytical Profile Index 또는 동정프로그램을 사용하여 데이터베이스상의 미생물을 찾는다.

1. 균액의 준비

가. 혐기성 상태의 혈액한천배지 균이 순수하게 배양되었는지 확인하고, 멸균된 면봉으로 충분히 집락을 취하여 키트와 함께 제공되는 API 20A Medium에 부유시켜 표준탁도 3 McFarland 이상 되게 한다.

나. 성장이 느린 균일 경우 충분한 집락을 얻기 위해 한 개 이상의 혈액한천배지가 필요할 수 있으며, 균액 조제시 너무 과도하게 섞지 않도록 하여 혐기성 상태를 유지한다.

2. 스트립의 준비 및 접종

가. 혐기챔버 또는 개별 혐기 주머니에서 배양하는 경우 :

- 키트와 함께 제공 되는 트레이와 뚜껑을 준비하고 충분한 습도를 유지하기 위해 트레이에 증류수 또는 탈이온수 5mL를 붓는다.

- 트레이 끝에 검체 번호를 기록하고 스트립을 트레이에 넣는다.

- 1.의 가.균액을 멸균 피펫으로 기포가 생기지 않도록 주의하며 분주한다.

GEL 웰은 튜브와 큐풀부분을 채우고 나머지 웰들은 튜브부분만 채운다. IND 웰은 광유로 큐풀부분을 채워 인돌시약의 증발을 막는다.

- 35-37℃, 24시간 배양한다.

나. 혐기성 jar에서 배양하는 경우 :

- 스트립을 동그랗게 구부려 빈 페트리디쉬에 끼워 넣고 스트립의 양끝과가운데 부분을 테이프로 붙여 고정한다.

- 페트리디쉬에 검체번호를 기입하고 1.의 가.균액을 멸균피펫으로 기포가 생기지 않도록 주의하며 분주한다. 모든 웰을 튜브 부분만 채우고 IND 웰은 광유로 덮을 수 있도록 분주량을 약간 적게 한다.

- 혐기성 jar에 넣고 35-37℃, 24시간 배양한다.

다. 광유를 이용하여 배양하는 경우(완전한 혐기성 배양이 어렵다.) :

- 키트와 함께 제공되는 트레이와 뚜껑을 준비하고 충분한 습도를 유지하기 위해 트레이에 증류수 또는 탈이온수 5mL를 붓는다.

- 트레이 끝에 검체 번호를 기록하고 스트립을 트레이에 넣는다.

- 1의 가.균액을 멸균피펫으로 기포가 생기지 않도록 주의하며 분주한다.

모든 웰을 튜브 부분만 채운 후 광유로 덮어 혐기성 상태가 되도록 한다.

- 35-37 ℃, 24시간 배양한다

３. 스트립의 판독

가. 35-37 ℃, 24시간 배양 후, 사용설명서의 판독표에 따라 결과를 판정하여 결과지에 기록한다. 성장이 느린 균주일 경우는 48시간 배양 후 판독한다.

나. 다음의 시약을 떨어뜨린다.

- GLU 웰 에서 ARA 웰 , GLY 웰 에서 TRE 웰 : BCP 시약 1 방울씩

- IND 웰 : XYL 시약을 광유 위로 1 방울 떨어뜨리고 잘 섞은 뒤 2-3분 방치한다. 여기에 EHR 시약 1 방울을 가해 5분 내에 판독했을 때 적색이면 양성반응이다.

다. 카탈라제 검사 : 스트립을 공기에 노출시키고 30분 후, 양성 반응을 보인 웰에 H₂O₂ 2 방울을 가해 거품이 생기면 카탈라제 양성으로 기록한다.

4. 동정

가. 결과지에는 시험 종목이 3개씩 묶어 한 그룹으로 되어 있고 각 그룹마다 차례로 1,2,4의 숫자가 적혀있다. 각 그룹의 반응에서 양성 결과에 대응하는 숫자만 더하면, 스트립상의 20개 검사와 카탈라제 검사 및 3 가지 형태학적 검사에 대해 8자리의 아라비아 숫자가 구해진다.

예)

나. Analytical Profile Index에서 8자리 숫자 결과에 상응하는 미생물을 찾거나 동정프로그램을 사용하는 경우 8자리 숫자 결과를 키보드로 입력한다.

API 20A 판독표

(1) 둥근 jar 에서 혐기성 배양할 경우, 색소 침착은 튜브의 아랫부분에서 관찰된다.

(2) 갈색-검정색은 스트립이 공기에 노출되었을 때 관찰된다 : 결과 판독시에 이것을 고려하여야 한다.