이테스트테트라사이클린 - 의약품 상세정보

① 4~5개의 집락을 선택하여 4~5mL의 트립틱 소이 브로스(tryptic soy broth)등 적당한 배지 5mL에 옮긴다.

② 35℃에서 16~20시간 배양한다.

③ 액체배지 또는 생리식염수 (0.85% NaCl)로 희석하여 0.5맥팔랜드 기준에 맞춘다. 상품화된 맥팔랜드탁도를 이용하거나, 균액을 광도계로 625nm에서 흡광도 0.08~0.10로 맞추어 사용한다.

① 접종액에 비독성 살균된 면봉을 충분히 적신다.

② 테스트 튜브의 벽 안쪽으로 면봉을 눌러서, 과잉의 접종액을 제거시킨다. 90mm 혹은 150mm의 뮬러힌톤한천배지 (4.0±0.5mm의 두께)의 전 표면에 세 번 정도 도말한다 (임균의 경우 1% 성장 첨가물을 첨가한 GC한천배지, 폐렴구균의 경우 5% Sheep Blood를 포함한 뮬러힌톤한천배지)

*성장첨가물: 1.1g L-시스테인, 0.03g 염산구아닌, 3mg 염산치아민, 13mg PABA, 0.01g B₁₂, 0.1g 코카르복실라제, 0.25g NAD, 1.0g 아데닌, 10g L-글루타민, 100g 포도당, 0.02g 질산철 (III) (in 1L H₂O)

③ 이테스트 스트립을 올려놓기 전, 10~15분간 실온에 방치하여 배지 표면이 완전히 건조되도록 한다.

① 150mm 플레이트 : 4~6개의 이테스트 스트립 테스트 가능

② 90mm 플레이트 : 1~2개의 이테스트 스트립 테스트 가능

150mm 플레이트                              90mm 플레이트

① 표시된 절취선을 따라 이테스트 패키지를 개봉한다.

② 이테스트 어플리케이터나 핀셋을 이용하여 배지 표면 위에 스트립을 올려놓는다. 이 때, 최고 MIC값이 플레이트 가장자리 쪽을 향하도록, MIC 눈금이 적혀 있는 면이 위로 올라오도록 한다.

③ 스트립의 전면이 배지 표면과 완전히 접촉하도록 다시 한 번 확인한다.

④ 35℃에서 다음 조건에 따라 배양한다.

① 배양시간이 지나면 (세균의 성장이 뚜렷이 관찰될 때), 이테스트 스트립과 타원형의 억제 모서리가 만나는 지점의 MIC 값을 읽는다.

- 스트립 전체를 따라서 균의 성장이 보이면, 즉 타원형의 억제 zone이 보이지 않을 경우, MIC 값은 이테스트 스트립의 최고 수치보다도 더 높게 보고되어져야 한다.

- 타원형의 억제 zone이 스트립 아래에 존재하면, 즉 zone의 모서리와 스트립이 교차하지 않으면, MIC 값은 스트립의 최저 수치보다도 더 낮게 보고되어져야 한다.

② 모든 성장이 완전히 억제된 점의 MIC 값을 읽는다. 흩어진 끝점 (end point)을 확인하기 위하여, 플레이트를 기울이거나 확대경을 사용한다 - 폐렴구균

테트라사이클린 (단위: ug/mL)