플루오로 AID-1 테스트(FLUORO AID-1 TEST) - 의약품 상세정보

순환성의 자기항체중 항미토콘드리아항체(AMA) 및 항평활근항체(ASMA)를 검출하는 것은 간질환, 특히 원발성담즙성간경변증(PBC)나 만성활동성간염의 진단에 큰 도움을 줍니다. AMA는 Mackay에 의해 최초로 보고되어 그 이후 Walker에 의해 본 항체는 PBC에 강한 특이성이 있음이 나타났습니다. PBC이외의 간질환에서는 만성활동성간염, 간경변, 약제기인성간염 등에서 검출되는 것이 있지만 AMA가가 40배 이상이 되는 것은 PBC만이라고 되어있습니다. 종래 PBC는 외과적수법에서 진단되고 있지만 본검사는 그에 대신할만하다고 평가되고 있습니다.

AID-1 TEST는 기질로서 쥐의 위(평활근)와 신장을 이용하여 형광항체간접법으로 항 평활근항체(ASMA)와 항미토콘드리아 항체(AMA)를 동시에 검출합니다. 반응원리는 위 및 신장의 절편이 분포된 슬라이드 위에 피검혈청(1차항체)을 적하하여 항원-항체반응을 실시한 후 미리 염소에서 면역하여 얻은 사람의 면역글로불린에 대한 항체에 형광효소 Fluorescein isothicyannate isomer (FITC)를 표식한것(2차항체)을 적하하여 다시 항원-항체반응을 실시하여 형광현미경하에서 관찰 판독합니다.

① 하나의 슬라이드에 동시에 2가지의 항체를 검출할 수 있습니다.

② 조작이 간단하고 단시간에 판독이 가능합니다.

③ AMA의 보체결합능 및 AMA, ASMA 면역글로불린의 종류(class)의 결정에도 응 용이 가능합니다.

1) 위/신장 기질 슬라이드 ……………………………… 4홀×10장

2) FITC 표식 항-인 Immunoglobulin ………………… 4.5㎖

3) PBS 분말 ……………………………………………… 9.1g×5장

4) AMA 대조 양성 혈청 ………………………………… 0.5㎖

5) ASMA 대조 양성 혈청 ……………………………… 0.5㎖

6) 봉입제 (Mounting Medium) ………………………… 3㎖

7) Glass Cover Slips …………………………………… 10 개

8) 흡수지 (Blotting Paper) ……………………………… 20장

1) 위, 신장 기질 슬라이드를 잠시동안 실온에 방치한 후 개봉합니다.

2) PBS분말 1장을 탈이온수 1000㎖에 가하여 용해합니다.(pH 7.2～2.4)

1) 검체혈청을 PBS용해액을 이용하여 20배, 40배 희석한다.

2) 희석된 검체혈청을 각각 1방울(20㎕)씩 슬라이드 원내에 적하한다.

3) 습윤상자안에서 30분간 반응시킨다.

4) 세척

ⓛ습윤상자안에서 슬라이드를 꺼내 검체혈청을 PBS용해액으로 깨끗이 세척해낸 다.

②세척된 슬라이드를 슬라이드 고정랙에 고정시킨 후 PBS용애액이 들어있는 비 이커(500㎖)에 장착하여 약 15분 정도 교반하면서 충분히 세척해낸다.

5) 세척이 끝난 슬라이드를 평면위에 올려놓고 흡수지를 사용하여 슬라이드 위의 수분을 제거해낸다.

6) 수분이 제거된 슬라이드글라스의 각 홀에 FITC표식 항-인면역글로불린을 1방울 씩 적하한다.

7) 습윤상자에서 30분간 반응시킨다.

8) 상기의 절차 4)～5)와 동일한 방법으로 세척을 한다.

9) 봉입제를 이용하여 봉입을 한다.

10) 형광현미경 100배에서 판독한다.

1) 성적의 해석

①ASMA

음성 : 정상인혈청과 똑같이 점막근판 및 근층의 평활근에 특이형광을 나타나지 않는 것.

양성 : 대조양성혈청과 똑같이 점막근판 및 근층의 평활근과 위의 점막하조직 및 신장의 혈관벽에 특이 형광이 나타나는 것.

② AMA

음성 : 정상인혈청과 똑같이 신장상피의 세관 및 세포질에 전혀 특이형광을 나타 내지 않는 것.

양성 : 대조양성혈청과 똑같이 신장상피의 세관 및 세포질에 특이형광을 나타내 는 것. 단 사구체등 비특이 형광이 나타나는 것은 음성으로 한다.

2) 성적의 판정

두 항체 모두 20배 이하는 음성으로 하고 40배 이상의 항체가는 ASMA에서는 만성활동성간염,AMA에서 원발성담즙성간염이 강하게 나타난다.

2～8℃, 제조 후 3개월