세로디아ㆍHIV-1/2(관납용)SerodiaㆍHIV-1/2 - 의약품 상세정보

Serodia ㆍ HIV-1/2는 젤라틴을 입자화한 인공담체(젤라틴 입자)에 불활성화 처리된 HIV-1 항원 또는 HIV-2 항원을 흡착시킨 것으로, 이 감작입자가 혈청/혈장의 HIV-1 항체 또는 HIV-2 항체와 반응하여 응집하는 것을 응용한 입자응집법에 의한 항 HIV-1 항체와 항 HIV-2 항체 검출용 시약입니다.

이 제품은 혈청 또는 혈장 내의 HIV-1과 HIV-2 항체의 검출을 위해 사용됩니다. 이 제품은 항-HIV 항체를 검출하게 디자인 되어 있으며 바이러스 항원을 직접적으로 검출하지는 못합니다. 따라서 다른 항체 검출용 분석법들과 마찬가지로 감염 초기의 매우 적은 양의 항체 또는 이른 초기의 seroconversion 기간에는 검출하지 못할 수도 있습니다.

1) 시험 조작이 매우 간단(microtiter법)하고 대량 검체의 스크리닝에 최적입니다.(특별한 검사기구가 필요하지 않습니다)

2) 반응시간이 짧고, 2시간 후에 육안으로 판정할 수 있습니다.

3) 담체에 유래하는 비특이응집을 가능한 한 제거할 목적으로 새로이 개발한 인공담체(Fuji Particle : 세계특허)를 이용하였습니다.

키트의 구성

Serodia ㆍ HIV-1/2 키트의 구성은 아래와 같습니다.

** 복원 후

A) 복원용액(액상) : 감작입자와 미감작입자의 복원에 사용합니다.

B) 검체희석용액(액상) : 검체의 희석에 사용합니다.

C-1) HIV-1 감작입자(동결건조) : 불활성화 처리된 HIV-1 항원이 감작된 젤라틴 입자의 동결건조품으로 병(vial)의 라벨에 적힌 소정의 복원용액으로 복원하여 사용합니다. 복원된 용액에는 불활성화 처리된 HIV-1항원이 감작된 젤라틴 입자 1%를 함유합니다.

C-2) HIV-2 감작입자(동결건조) : 불활성화 처리된 HIV-2 항원이 감작된 젤라틴 입자의 동결건조품으로 병(vial)의 라벨에 적힌 소정의 복원용액으로 복원하여 사용합니다. 복원된 용액에는 불활성화 처리된 HIV-2항원이 감작된 젤라틴 입자 1%를 함유합니다.

D) 미감작입자(동결건조) : 탄닌산으로 처리된 젤라틴 입자의 동결건조품으로 소정의 복원용액으로 용해 복원하여 사용합니다.

E) 양성컨트롤 : 불활성화 처리된 HIV-1 항원, HIV-2 항원 면역 토끼혈청으로, 표 2의 시험법으로 시험했을 때 HIV-1 감작입자에 대해 최종희석배수 1:128, HIV-2 감작입자에 대해 최종희석배수 1:256의 항체역가를 나타냅니다.

악세사리 : 드로퍼(Dropper) 약 25㎕용 (4개)

주의 : 복원 된 감작입자 및 미감작입자는 검사 전 반드시 상온(15-30℃)에서 최소한 30분 이상 방치 후 사용되어야 합니다.

Serodia ㆍ HIV-1/2 사용 시 다음과 같은 기구를 준비하십시오.

(1) Microplate U형

(2) 다일루터(Diluter) 25㎕용

(3) 파이펫 드로퍼(dropper) 25㎕용

(4) 마이크로파이펫 및 부피 측정용 파이펫

(5) 드로퍼(droppers)

(6) 트레이 믹서(Tray Mixter ; automatic vibrator shacker)

(7) 트레이 뷰어(Tray Viewer)

가. 검체 준비

혈청이나 혈장 내에 적혈구, 기타 유형성분이 함유되어 있으면 시험 결과에 지장이 있으므로 원심분리하여 제거한 후 검사하십시오.

나. 동결건조 된 입자의 복원

감작입자와 미감작입자의 복원 시에는 테이블 위에 놓고 시험 시작 전, 실온(15-30℃)에서 30분간 방치한 후 사용합니다.

다. 정성법

시험방법(표1 참조)

1) 마이크로플레이트 (Microplate)에 검체희석용액을 드로퍼 (Dropper)로 제 1well에 3방울(75㎕), 제 2, 제 3, 제4well에 1방울(25㎕)씩 적하합니다.

2) 마이크로 파이펫(Micropipette)으로 검체를 25㎕ 취하여 제 1well에 넣고 파이페팅을 6-7회 실시하여 well 내부의 검체희석용액과 혼합합니다. 이렇게 희석된 제 1well의 검체 25㎕를 2번째 well에 넣고 1well과 같은 방법으로 혼합합니다. 이 과정을 4well까지 반복하여 2^N 희석을 실시합니다. 마지막 4well의 25㎕는 파이펫으로 제거합니다.

3) 키트에 포함된 드로퍼(Dropper)를 이용하여 미감작입자 1방울(25㎕)를 2well에 넣고 HIV-1감작입자 1방울(25㎕)를 3well에, HIV-2 감작입자 1방울(25㎕)를 4well에 넣습니다.

4) 트레이 믹서(Tray Mixer) 등을 이용하여 잘 혼합합니다. 만약 믹서를 사용하지 않고 매뉴얼로 혼합할 경우 플레이트 네 끝부분을 몇 번씩 처서 혼합한 후 뚜껑을 덮고 실온에 수평으로 방치하고 2시간 후 판독합니다.

표1. 정성법

라. 정량법

정성법에서 양성으로 판정된 피검혈청에 대해서는 확인하는 의미에서 정량법을 실시합니다.

시험방법(표2 참조)

1) 마이크로플레이트(Microplate)에 검체희석용액을 드로퍼(Dropper)로 제 1well에 75㎕, 제 2well부터 최종 well까지 25㎕(1방울)씩 적하합니다.

2) 마이크로 파이펫(Micropipette)으로 검체를 25㎕ 취하여 제 1well에 넣고 파이페팅을 6-7회 실시하여 well 내부의 검체희석용액과 혼합합니다. 이렇게 희석된 제 1well의 검체 25㎕를 2번째 well에 넣고 1well과 같은 방법으로 혼합합니다. 이 과정을 최종well까지 반복하여 2^N 희석을 실시합니다.

3) 키트에 포함된 드로퍼(Dropper)를 이용하여 미감작입자 1방울(25㎕)를 2well에 넣고, 항HIV-1항체가를 측정하는 경우에는 HIV-1감작입자 1방울(25㎕)를 3well부터 최종well에 넣습니다. 그리고 항HIV-2항체가를 측정하는 경우에는 HIV-2감작입자 1방울(25㎕)를 4well부터 최종well에 넣습니다.

4) 트레이 믹서(Tray Mixer) 등을 이용하여 잘 혼합하고 뚜껑을 덮은 후, 실온(15-25℃)에 수평으로 방치하고 2시간 후 패턴을 관찰합니다.

표2 정량법

마. 대조시험

1) 검체와 미감작입자(최종희석배수 1:16)의 반응이 음성(-)임을 확인합니다.

2) 검체희석용액과 미감작입자 또는 감작입자가 반응이 없음(-)을 확인합니다(시약 컨트롤 ; 미디엄 대조).

3) 매 로트(lot)에서 양성컨트롤의 최종 희석배수가 표2의 시험방법에 따라 시험했을 때 HIV-1 감작입자의 경우 최종희석배수 1:128±1well 이내에서 양성, HIV-2 감작입자는 최종희석배수 1:256±1well임을 확인합니다.

바. 결과판정

마이크로플레이트를 조심스럽게 비간접 광원의 트레이 뷰어(tray viewer)나 밝은 흰 표면위로 옮깁니다. 음성 응집 패턴을 시약 컨트롤(미디엄 대조)와 비교하여 표3의 판정기준에 따라 육안으로 판정합니다.

표3 판정기준

** 검체가 표1의 시험방법에 따라 시험했을 때 표3의 판정기준에 따라 판정보류(±)의 결과를 나타낸다면 다른 시험법으로 검사하여 정확한 결과를 확인하여야 합니다.

사. 판정기준

미감작입자가 음성이고, HIV-1 감작입자가 1 : 32 이상에서 응집을 보이고, HIV-2 감작입자가 1 : 64 이상에서 응집을 보이는 것을 양성으로 하고, 정량법의 경우는 각각 응집을 보인 최종희석배수를 가지고 항체가로 합니다.

< 표 4 > 판정결과의 해석 (미감작입자 : 음성)

* 항 HIV-1 항체와 항 HIV-2 항체의 감별에는 기타 전용시약을 사용하십시오.

아. 흡수조작

만약 검체가 미감작입자와 응집을 일으킨다면, 다음의 흡수조작 과정을 거친 후 재시험을 실시하여야 합니다. :

1) 복원된 350㎕의 미감작입자 용액을 작은 시험관에 넣습니다.

2) 50㎕의 검체를 시험관에 넣고 잘 혼합한 후 실온(15-25℃)에서 20분간 방치합니다.

3) 2,000rpm에서 5분간 원심분리한 후 분리된 상청액(혈청 희석 배수 1:8)을 조심스럽게 50㎕ 취하여 마이크로플레이트의 2well에 넣습니다.

4) 3, 4well에 검체희석용액을 1방울(25㎕)씩 넣습니다. 그리고 다일루터 또는 파이펫을 이용하여 2well에서 4well까지 2^N 희석을 실시합니다.

5) 이후의 시험법은 정성 시험 과정과 결과 판독에 따릅니다.