| 성상 | 별첨 |
|---|---|
| 업체명 | 아산제약(주) |
| 위탁제조업체 | FUJIREBIO INC. |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2010-03-05 |
| 품목기준코드 | 201001914 |
| 표준코드 | 8806488071103, 8806488071110 |
총량 : 1 Kit(100 tests) : 복원용액(10ml x 1),검체희석용액(20ml x 1), 감작입자(0.6ml x 5), 미감작입자(1.0ml x 5),양성컨트롤(0.5 ml x 1),드로퍼 2개 - 감작입자 | 성분명 : 불활성화처리 HIV-1 항원감작 젤라틴입자 | 분량 : 6 | 단위 : 마이크로리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 6 ul/0.6ml
총량 : 1 Kit(100 tests) : 복원용액(10ml x 1),검체희석용액(20ml x 1), 감작입자(0.6ml x 5), 미감작입자(1.0ml x 5),양성컨트롤(0.5 ml x 1),드로퍼 2개 - 양성컨트롤 | 성분명 : 불활성처리 HIV-1항원면역토끼혈청 | 분량 : 1.7 | 단위 : 마이크로리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 1.7ul/0.5ml
총량 : 1 Kit(100 tests) : 복원용액(10ml x 1),검체희석용액(20ml x 1), 감작입자(0.6ml x 5), 미감작입자(1.0ml x 5),양성컨트롤(0.5 ml x 1),드로퍼 2개 - 미감작입자 | 성분명 : 탄닌산처리젤라틴입자 | 분량 : 10 | 단위 : 마이크로리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 10ul/1ml
사람의 혈청 및 혈장 중의 HIV-1 바이러스 항체 검출
측정법의 원리
본 시험은 젤라틴을 입자 화 한 새로운 인공담체(젤라틴 입자)에, Human Immunodeficiency Virus ; HIV(사람면역 결핍 바이러스)주1)를 계면활성제로 처리하여 얻어진 불활성화 처리 항원을 흡착시킨 것으로, 이 감작입자가 혈중의 HIV 항체에 의해 응집하는 것을 응용한 입자응집반응(Particle Agglutination)시약입니다.
주1) 바이러스 생산균주의 배양 상청을 농축하여 자당밀도구배원심분리법에 의해 얻을 수 있는 비중 1.16의 바이러스분획방법입니다.
특징
1) 시험 조작이 매우 간단(microtiter법)하고 대량 검체의 스크리닝에 최적입니다.(특별한 검사기구가 필요하지 않습니다)
2) 반응시간이 짧고, 2시간 후에 육안으로 판정할 수 있습니다.
3) 담체에 유래하는 비특이응집을 가능한 한 제거할 목적으로 새로이 개발한 인공담체(Fuji Particle : 세계특허)를 이용하였습니다.
키트의 구성
Serodia-HIV 키트의 구성은 아래와 같습니다.
| 시약 최대 검사량 |
복원용액 (액상) A |
검체희석용액 (액상) B |
감작입자 (동결건조품) C |
미감작입자 (동결건조품) D |
양성컨트롤 (액상) E |
| 5 x 20(100T) |
10㎖ 1vial |
20㎖ 1vial |
0.6㎖** 5vials |
1.0㎖** 5vials |
0.5㎖ 1vials |
| 4 x 25(220T) |
20㎖ 1vial |
40㎖ 1vial |
1.5㎖** 4vials |
2.0㎖** 4vials |
0.5㎖ 1vials |
| 5 x 110(550T) |
20㎖ 2vials |
45㎖ 2vials |
3.0㎖** 5vials |
3.5㎖** 5vials |
0.5㎖ 1vials |
** 복원 후
A) 복원용액(액상) : 인산수소이나트륨, 인산이수소칼륨, 염화나트륨. 이 시약에는 0.10%(w/v)의 아지드나트륨이 보존제로 함유되어 있습니다. 감작입자(C)와 미감작입자(D)의 복원에 사용합니다.
B) 검체희석용액(액상) : 인산수소이나트륨, 인산이수소칼륨, 염화나트륨. 이 시약에는 0.10%(w/v)의 아지드나트륨이 보존제로 함유되어 있습니다. 검체의 희석에 사용합니다.
C) 감작입자 : 불활성화 처리된 HIV-1 항원이 감작된 젤라틴 입자의 동결건조품으로 병(vial)의 라벨에 적힌 소정의 복원용액으로 복원하여 사용합니다. 복원 후의 1% 불활성화 처리된 HIV 항원이 감작된 젤라틴 입자는 보존제로 0.12%(w/v)의 아지드나트륨을 함유하게 됩니다.
D) 미감작입자(동결건조) : 탄닌산으로 처리된 젤라틴 입자의 동결건조품으로 병(vial)의 라벨에 적힌 소정의 복원용액으로 용해 복원하여 사용합니다. 복원 후에는 보존제로 0.12%(w/v)의 아지드나트륨을 함유하게 됩니다.
E) 양성컨트롤 : 비활성 된 HIV 항원 면역 토끼혈청으로 항체 역가가 1:128이 되도록 희석되어 있습니다. 이 제품은 0.10%(w/v)의 아지드나트륨을 보존제로 함유하고 있습니다.
악세사리 : 드로퍼(Dropper) 약 25㎕용(2개)
감작입자, 미감작입자의 적하에만 사용합니다.
주의 : 복원 된 감작입자 및 미감작입자는 검사 전 반드시 상온(15-30℃)에서 최소한 30분 이상 방치 후 사용되어야 합니다.
1. 시험 기구 준비
Serodia-HIV 사용 시 다음과 같은 기구를 준비하십시오.
(1) Microplate U형
(2) 파이펫
- 마이크로파이펫(팁 포함)
검체의 분주 및 희석을 위한 25㎕용
흡수조작시의 검체의 분주를 위한 50㎕용
(3) 시약 복원을 위한 1㎖, 5㎖용 파이펫
(4) 복원 된 감작입자 및 미감작입자의 적하를 위한 드로퍼 약 25㎕용
(5) 25㎕ 마이크로타이터(microtiter) - 다일루터(Diluter ; 선택사항)
(6) 트레이 믹서(Tray Mixter ; automatic vibrator shacker ; 선택사항)
(7) 트레이 뷰어(Tray Viewer ; 선택사항)
만약 마이크로파이펫 대신 마이크로타이터-다일루터(Microtiter-diluter)를 검체 희석시에 사용할 경우 사용상의 주의사항 5와 같은 과정을 거친 후 사용하여야 합니다.
2. 시험방법
가. 검체 준비
혈청이나 혈장 내에 적혈구, 기타 유형성분이 함유되어 있으면 시험 결과에 지장이 있으므로 원심분리하여 제거한 후 검사하십시오. 혈청의 비동화(비활성화 ; 56℃에서 30분간 가온)는 반드시 요구되는 사항이 아닙니다. 시험 결과에 영향을 주지 않습니다.
나. 정성법
시험방법(표1 참조)
1) 마이크로플레이트 (Microplate)에 검체희석용액을 드로퍼 (Dropper)로 제 1well에 75㎕, 제 2, 제 3well에 25㎕(1방울)씩 적하합니다.
2) 마이크로 파이펫(Micropipette)으로 검체를 25㎕ 취하여 제 1well에 넣고 파이페팅을 3-4회 실시하여 well 내부의 검체희석용액과 혼합합니다. 이렇게 희석된 제 1well의 검체 25㎕를 2번째 well에 넣고 1well과 같은 방법으로 혼합합니다. 이 과정을 3well까지 반복하여 2N 희석을 실시합니다.
3) 키트에 포함된 드로퍼(Dropper)를 이용하여 미감작입자 1방울(25㎕)를 2well에 넣고 감작입자 1방울(25㎕)를 3well에 넣습니다.
4) 트레이 믹서(Tray Mixer) 등을 이용하여 잘 혼합하고 뚜껑을 덮은 후, 실온(15-25℃)에 수평으로 방치하고 2시간 후 패턴을 관찰합니다.
표1. 정성법(혈청/혈장 검체)
| Well No. |
1 |
2 |
3 |
| 검체희석용액(㎕) 검체(㎕) |
75 ) 25 |
25 ) 25 |
25 ) 25 |
| 검체희석배수(㎕) |
1 : 4 |
1 : 8 |
1 : 16 |
| 미감작입자(㎕) |
25 |
||
| 감작입자(㎕) |
25 |
||
| 최종희석배수 |
1 : 16 |
1 : 32 |
|
| 트레이 믹서(Tray Mixer)로 잘 혼합 후, 뚜껑을 덮어 2시간 방치 |
|||
| 판 정 |
|||
다. 정량법
정성법에서 양성으로 판정된 피검혈청에 대해서는 확인하는 의미에서 정량법을 실시합니다.
시험방법(표2 참조)
1) 마이크로플레이트(Microplate)에 검체희석용액을 드로퍼(Dropper)로 제 1well에 75㎕, 제 2well부터 최종 well까지 25㎕(1방울)씩 적하합니다.
2) 마이크로 파이펫(Micropipette)으로 검체를 25㎕ 취하여 제 1well에 넣고 파이페팅을 3-4회 실시하여 well 내부의 검체희석용액과 혼합합니다. 이렇게 희석된 제 1well의 검체 25㎕를 2번째 well에 넣고 1well과 같은 방법으로 혼합합니다. 이 과정을 최종well까지 반복하여 2N 희석을 실시합니다.
3) 키트에 포함된 드로퍼(Dropper)를 이용하여 미감작입자 1방울(25㎕)를 2well에 넣고 감작입자 1방울(25㎕)를 3well부터 최종well에 넣습니다.
4) 트레이 믹서(Tray Mixer) 등을 이용하여 잘 혼합하고 뚜껑을 덮은 후, 실온(15-25℃)에 수평으로 방치하고 2시간 후 패턴을 관찰합니다.
표2 정량법
| 1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
... |
12 |
|
| 검체희석용액(㎕) 검체 또는 양성컨트롤(㎕) |
75 ) 25 |
25 ) 25 |
25 ) 25 |
25 ) 25 |
25 ) 25 |
25 ) 25 |
... |
25 ) 25 |
| 검체희석배수 |
1:4 |
1:8 |
1:16 |
1:32 |
1:64 |
1:128 |
... |
1:8192 |
| 미감작입자(㎕) |
25 |
|||||||
| 감작입자(㎕) |
25 |
25 |
25 |
25 |
... |
25 |
||
| 최종희석배수 |
1:16 |
1:32 |
1:64 |
1:128 |
1:256 |
... |
1:16384 |
|
| 트레이 믹서(Tray Mixer)로 잘 혼합 후, 뚜껑을 덮어 2시간 방치 |
||||||||
| 판 정 |
||||||||
라. 대조시험
1) 검체와 미감작입자(최종희석배수 1:16)의 반응이 음성(-)임을 확인합니다.
2) 검체희석용액과 미감작입자 또는 감작입자가 반응이 없음(-)을 확인합니다(시약 컨트롤 ; 미디엄 대조).
3) 매 로트(lot)에서 양성컨트롤의 최종 희석배수가 표2의 시험방법에 따라 시험했을 때 1:128배에서 양성임을 확인합니다.
마. 판정기준
마이크로플레이트를 조심스럽게 비간접 광원의 트레이 뷰어(tray viewer)나 밝은 흰 표면위로 옮깁니다. 음성 응집 패턴을 시약 컨트롤(미디엄 대조)와 비교하여 표3의 판정기준에 따라 육안으로 판정합니다.
표3 판정기준
| 반응상 |
판독 |
판정 |
| 입자가 단추모양으로 보이며, 테두리가 균등한 매끄러운 원형을 나타내는 것 |
(-) |
음성 |
| 입자가 작은 고리모양으로 모이며, 테두리가 균등한 매끄러운 원형을 나타내는 것 |
(±)*** |
판정 보류 |
| 입자 고리가 분명히 크며, 테두리가 불균등하게 거칠어 주변에 응집을 보이는 것 |
(+) |
양성 |
| 응집이 균일하게 일어나고, 응집입자가 바닥전체에 막모양으로 퍼져있는 것 |
(++) |
*** 검체가 표1의 시험방법에 따라 시험했을 때 표3의 판정기준에 따라 판정보류(±)의 결과를 나타낸다면 다른 시험법으로 검사하여 정확한 결과를 확인하여야 합니다.
바. 결과 판정
시험 결과 검체의 결과가 미감작입자(최종희석배수 1:16)에서 음성을 나타내지만 감작입자와 응집을 보이면(최종희석배수 1:32 또는 그 이상) 양성으로 판정합니다.
사. 흡수조작
만약 검체가 미감작입자와 응집을 일으킨다면, 다음의 흡수조작 과정을 거친 후 재시험을 실시하여야 합니다. :
1) 1방울(25㎕)의 검체희석용액을 제 3well에 넣습니다.
2) 복원된 350㎕의 미감작입자 용액을 작은 시험관에 넣습니다.
3) 50㎕의 검체를 시험관에 넣고 잘 혼합한 후 실온(15-25℃)에서 20분간 방치합니다(중간 중간 1-2회 혼합해줍니다).
4) 2,000rpm에서 5분간 원심분리한 후 분리된 상층액(혈청희석배수 1:8)을 조심스럽게 50㎕ 취하여 마이크로플레이트의 2well에 넣습니다.
5) 2well의 용액을 마이크로파이펫으로 3, 4회 파이페팅하여 혼합한 다음 25㎕를 제 3well에 넣고 혼합하여 2N 희석을 실시합니다.
6) 이후의 시험법은 정량 시험 과정과 결과 판독에 따릅니다.
아. 판정기준
본 시험에 있어서 미감작입자가 음성(최종희석배수 1:16)으로, 감작입자(최종희석배수 1:32 이상)가 응집반응을 나타내는 것을 양성으로 하고, 정량법에서는 양성을 나타낸 최종희석배수를 항체가로 합니다.
자. 흡수조작을 필요로 하는 피검혈청과 그 처리방법
미감작입자 및 감작입자의 양성을 나타낸 혈청에 대해서는 다음의 순서에 따라서 흡수조작을 한 후에 재시험 하십시오.
① 소시험관(원심분리관)에 소정 량의 복원용액으로 복원한 미감작입자를 0.35㎖를 넣습니다.
② 피검혈청을 0.05㎖ 가해서 잘 혼합하고 실온(15-25℃)에 20분 이상 방치합니다(도중 1-2회 잘 흔들어줍니다).
③ 원심침전(2,000rpm, 5분)하여 그 상청 액을 주의하여 분취(흡수 후 검체희석비는 1:8)하고, 플레이트의 제 2well에 50㎕ 취합니다.
④ 제 3well 이하는 미리 검체희석용액을 25㎕ 씩 적하하고, 제 2well에 다일루터(Diluter)를 넣고 2N 희석을 실시합니다.
⑤ 이하 정량시험과 동일조작을 하여 판정합니다.
1. 검사 시 주의사항
1) 마이크로플레이트 well 내용물의 충분한 혼합이 이루어져야만 올바른 결과를 나타냅니다.
2) 인큐베이션 중에는 마이크로플레이트에 반드시 뚜껑을 덮고, 진동을 주지 마십시오.
3) 마이크로플레이트의 재사용 시 세척은 반응에 중요한 영향을 주므로 충분히 주의하십시오. 플레이트 내에 소독제 또는 계면활성제가 남지 않도록 합니다.
4) 키트에 포함된 각 시약의 로트의 품질 확인은 U-마이크로플레이트를 사용하여 얻어진 검사 결과를 기본으로 합니다.
5) 만약 마이크로파이펫(micropipette) 대신 마이크로다일루터(microdilutor)를 이용하여 검체를 희석할 경우, 다음과 같은 과정을 수행하여야 좋은 결과를 얻으실 수 있습니다 ; 각 검체의 검사 전, 다일루터의 팁 끝을 불꽃(중간세기의 가스버너의 산화성 불꽃과 환원성 불꽃의 사이)에 5-10초간 가열합니다. 이것을 식히기 위해 생리식염수 또는 증류수에 사용 전 담궈 둡니다. 사용 후에는 팁 부분을 가스버너에 달구어 식히고 2% 글루타르알데히드(glutaraldehyde) 용액에 담궈 오염을 방지하고 마르지않도록 합니다. 재사용 전에는 물에 세척하고 불꽃에 재가열한 후 식히고 증류수나 생리식염수에 담급니다.
6) 검사에 사용되는 모든 기구(파이펫, 튜브 등)와 폐액, 팁, 종이 등은 HIV, HBV 또는 다른 기타 바이러스의 감염성이 있는 것으로 간주하고 취급에 주의해 주십시오. 오염물질의 제거를 위해 2.5%의 글루타르알데히드용액에 30-60분간, 또는 1% 글루타르알데히드용액에 하룻밤동안 담그어 두거나 고압증기멸균(121℃에서 20분간 혹은 115℃에서 30분간) 또는 소각처리 합니다.
7) 본 제품의 동결건조품 시약은 당일 복원 사용을 원칙으로 하나 2-10℃에서 보관시 7일간 안정합니다.
2. 취급시 주의사항
1) 본 키트는 HIV-1 항체를 검출하도록 디자인 되어있을 뿐 HIV-1 항원을 직접적으로 검출하지는 못합니다. 다른 항체 검출 검사법들과 마찬가지로, Serodia-HIV 제품은 초기의 감염 또는 혈청전환기(seroconversion)의 아주 적은 농도의 항체를 검출하지 못할 수도 있습니다. 만약 검사 결과가 음성으로 나왔다 하더라도 증상 및 다른 정보들을 종합적으로 이용하여 의학적 진단에 이용하여야 합니다. 그러므로 양성 또는 음성의 결과가 HIV 바이러스의 감염 유무를 나타내는 것은 아닙니다. 환자 상태의 종합적 판단은 환자의 증상에 대한 주의 깊은 분석과 질병의 진단을 위한 유효한 검사 결과들을 바탕으로 종합적으로 이루어져야합니다.
2) 본 검사에서 HIV-1 바이러스 항체의 양성 결과들은 다른 검사법(Western Blot, Indirect-fluorescent Antibody test, Radioimmunoprecipitation test 등)을 실시하여 확인하도록 합니다. AIDS의 확실한 진단을 위해서는 면역력과 임상 증상의 검토를 위한 세포 기능 검사(cellular function test)가 매번 반드시 함께 수행되어야 합니다.
3) 비록 파티클에 흡착된 항원은 감염성을 가지고 있지는 않지만, HBV와 동일하게 주의하여 취급해 주십시오.
4) 모든 시약은 보존제로서 아지드나트륨을 함유하고 있습니다. 아지드나트륨은 실험실의 배관 내의 구리와 반응하여 폭발성의 아지드 화합물을 생성합니다. 그러므로 시약을 버리실 때에는 다량의 물과 함께 희석하여 버려주십시오.
| 저장방법 | 2-10℃에서 밀봉 |
|---|---|
| 사용기간 | 제조 후 12개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 100Test/kit, 220Test/kit, 550Test/kit |
| 보험코드 | |
| 보험약가 | |
| 보험적용일 |
서울 부산 인천 대구 광주 대전 울산 경기 강원 충북 충남 전북 전남 경북 경남 제주 세종시