| 성상 | 별첨 |
|---|---|
| 업체명 | 신진메딕스(주) |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2010-04-20 |
| 품목기준코드 | 201002906 |
| 표준코드 | 8806623024605, 8806623024612 |
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 항체흡착플레이트 | 성분명 : 마우스 항 소 신경특이 에놀라제(NSE21) 단클론 항체 | 분량 : 83 | 단위 : 마이크로그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액0ng/mL | 성분명 : 염소혈청 | 분량 : 1 | 단위 : 밀리리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액 5ng/mL | 성분명 : 신경특이 에놀라제(NSE) | 분량 : 5 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(5ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액25ng/mL | 성분명 : 신경특이 에놀라제(NSE) | 분량 : 25 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(25ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액50ng/mL | 성분명 : 신경특이 에놀라제(NSE) | 분량 : 50 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(50ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액100ng/mL | 성분명 : 신경특이 에놀라제(NSE) | 분량 : 100 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(100ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 반응정지액 | 성분명 : 2N황산 | 분량 : 20 | 단위 : 밀리리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 정도관리혈청1 | 성분명 : 신경특이에놀라제(NSE)혈청 | 분량 : 5 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(5ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 정도관리혈청2 | 성분명 : 신경특이에놀라제(NSE)혈청 | 분량 : 22 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(22ng/1mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 희석용완충액 | 성분명 : 염소혈청 | 분량 : 15 | 단위 : 밀리리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 접합체액 | 성분명 : 마우스 항 소 신경특이 에놀라제(NSE19)단클론항체와 고초냉이과산화효소 접합체액 | 분량 : 4 | 단위 : 마이크로그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(4ug/20mL)
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 기질액 | 성분명 : 테트라메틸벤지딘 | 분량 : 0.05 | 단위 : 질량백분율 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트(96well/1포),표준액(1mL/1병,동결건조)x6,정도관리혈청(1mL/1병.동결건조)x2,희석용완충액(15mL/1병),접합체액(20mL/1병),농축세척액(20배농축액,50mL/1병),기질액(20mL/1병),반응정지액(20mL/1병) - 표준액200ng/mL | 성분명 : 신경특이 에놀라제(NSE) | 분량 : 200 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(200ng/1mL)
사람 혈청내의 신경특이에놀라제(NSE)에 대한 정량검사
1. 검체 준비
가. 검체는 혈청을 사용하며, 혈구나 혈액 응고 성분, 지방질이 많은 경우 원심하여 완 전히 제거한다. 또한 심하게 용혈된 검체는 위양성을 보일 수 있으므로 사용하지 않는다.
나. 검체내 보존제 중 질화나트륨이 함유되어 있을 경우 위음성을 보일 수 있으므로 주의한다.
다. 검체의 농도가 표준액의 최고 농도인 200ng/mL보다 높을 경우, 검체를 희석용 완 충액으로 희석(10배, 50배, 100배)하여 검사를 수행하며, 희석된 검체인 경우 계산 된 농도 값에 희석 배수를 곱하여 최종 농도를 결정한다.
2. 시약의 조제
가. 세척액의 조제
농축 세척액을 증류수 또는 이온 정제수로 20배 희석하여 필요한 양만큼 준비한다.
예) 필요량이 1000mL일 경우 농축 세척액 50mL에 증류수나 이온 정제수 950mL를 넣어 총 부피가 1000mL가 되도록 한 다음 잘 섞는다.
※ 농축 세척액은 냉장 보관 상태에서 결정이 생길 수도 있다. 이 경우 37℃±1℃ 항온수조에 녹인 다음 사용한다.
나. 동결건조 표준액과 정도관리 혈청의 희석
동결건조 표준액 6개와 정도관리 혈청2개에 희석용 완충액을 1mL씩 넣어 충분히 혼합한다.
3. 개봉 시약의 보관 조건 및 보존 기간
| 내용물 |
보관 조건 |
유효기간 |
| 항체 흡착 플레이트 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 표준액 |
2 ~ 8℃ |
7일 |
| -20℃ |
2개월 |
|
| 정도관리혈청 |
2 ~ 8℃ |
7일 |
| -20℃ |
2개월 |
|
| 희석용 완충액 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 농축 세척액 |
2 ~ 8℃ |
키트 사용기한까지 |
| 희석 농축 세척액 |
2 ~ 8℃ |
60일 |
| 실 온 |
30일 |
|
| 접합체액 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 기질액 |
2 ~ 8℃ |
1개월 |
| 반응 정지액 |
2 ~ 8℃ 또는 실온 |
키트 사용기한까지 |
4. 검사법
가. 검사 전 준비사항
1) 모든 시약은 실험 시작 30분 전에 실온에 두고 사용 전 가볍게 흔들어 잘 섞은 후 사용한다.
2) 사용 후 남은 플레이트는 첨부된 비닐포에 방습제와 함께 잘 밀봉하여 2～8℃에 보관한다.
3) 검체는 사용 전에 충분히 혼합한 다음 사용한다. 특히 동결되었던 검체는 반드시 균질화 시킨 후 사용한다.
나. 검사 방법
1) 각 검사시 1개의 기질 blank,농도별로 각각2개의 표준액, 2개의 정도관리 혈청, 검사하고자 하는 검체의 수를 결정한 후 필요한 웰 만큼 스트립을 홀더에 고정 시킨다.
2) 각 농도의 표준액과 정도관리혈청 그리고 검체를 각각의 항체 흡착 플레이트에 50uL씩 분주한다.
3) blank를 제외한 각각의 well에 접합체액 100uL를 분주한다.
4) 스트립 홀더를 가볍게 쳐서 잘 혼합 후 밀봉 테이프로 밀봉하고 300rpm으로 30분(±5분)동안 반응시킨다.
5) 반응 후 밀봉 테이프를 제거하고 각 well의 내용물을 흡입해내고 미리 제조된 세척액으로 5회 세척한다.(각 well당 300uL 이상)
6) 세척이 완료되면 플레이트를 흡습지에 뒤집어 적당히 쳐서 제거되지 아니한 세척액을 완전히 제거한 다음 기질액을 Blank를 포함한 모든 well에 100uL씩 넣고 스트립홀더를 가볍게 쳐서 잘 혼합한 후 실온(18～25℃) 암소에서 20분(±5분)동안 반응시킨다.
7) 반응이 완료되면 반응 정지액을 모든 well에 100uL씩 분주하여, 흔들어 주어 반응이 잘 일어나게 한다.
8) 플레이트 바닥을 부드러운 흡습지로 잘 닦아 습기를 제거하고 측정파장 450nm, 참조파장(reference) 620nm에서 흡광도를 측정한다.
* 흡광도 측정은 반응 정지액을 분주한 후 30분 이내에 측정하여야 한다.
< 검사과정 요약 >
| Reagent Tube |
표준액 |
정도관리혈청 |
검체 |
| 표 준 액 |
50uL |
- |
- |
| 검 체 |
- |
- |
50uL |
| 정도관리혈청 |
- |
50uL |
- |
| 접합체액 |
100uL |
||
| Incubation |
실온(18~25℃), 30min(±5분) - 300rpm shaking |
||
| 세 척 |
흡입과 세척 : 5회 (세척액) |
||
| 기질액 |
100uL |
||
| Incubation |
실온(18~25℃), 20min(±5분) ,암소 |
||
| 반응정지액 |
100uL |
||
| 흡광도 측정(450nm/620nm) |
|||
5. 결과 계산
가. 각 표준액과 검체에 대한 흡광도 값을 계산한다.
나. 표준곡선 그래프 조건은 4-parameter로 정하고 X축과Y축은 Linear로 설정 한다.
다. 표준 곡선 작성을 위하여 X축을 표준액 농도(ng/mL)로, Y축을 흡광도 값으로 하여 표준 곡선을 그린다.
라. 표준 곡선을 이용하여 검체의 흡광도 값을 대입하여 농도값을 산출한다.
마. 결과 계산의 예
※ 아래 값은 실험 결과의 예를 나타낸 단순한 실례이므로 실제 실험시 적용해서는 안 된다.
1) 실험 결과
| 구분 |
O.D. |
엔에스이농도(ng/mL) |
|
| 표준액 1 |
0 ng/mL |
0.012 |
|
| 표준액 2 |
5 ng/mL |
0.077 |
|
| 표준액 3 |
25 ng/mL |
0.228 |
|
| 표준액 4 |
50 ng/mL |
0.452 |
|
| 표준액 5 표준액 6 |
100 ng/mL 200 ng/mL |
0.902 1.824 |
|
| 정도관리혈청1 정도관리혈청2 |
0.081 0.200 |
5.18 20.65 |
|
| 검체 1 |
0.061 |
4.02 |
|
| 검체 2 |
0.342 |
37.22 |
|
2) 표준 곡선 그래프
6. 측정범위
: 0.5 ng/mL~187.5 ng/mL
7. 정도 관리
가. 정도관리 혈청 농도는 3.5~6.5ng/mL, 17~26ng/mL 범위내에 포함 되어야 한다.
나. 흡광도는 검체의 농도가 증가 할수록 증가 한다.
8. 반응원리
이 검사는 비경쟁 반응에 의한 효소면역측정법(ELISA)으로서, 두 개의 서로 다른 단클론 NSE항체를 사용하여 Sandwich를 형성한다. 이중 하나는 플레이트에 흡착되어 있고,다른 하나는 Enzyme으로 접합되어 있다. 실온에서 30분 동안 반응하는 동안 검체에 존재하는 NSE는 플레이트에 흡착된 단클론 NSE 항체와 결합하고 이미 형성된 항원-항체 복합체에 Enzyme으로 접합된 단클론 NSE항체가 결합하여 Sandwich를 형성한다. 이중 결합하지 않은 물질은 세척과정에서 제거 되고, 고정상에 결합된 복합체의 양은 검체 중 NSE의 양에 비례 하며,이것의 농도는 분광광도계로 측정하여 계산한다.
1. 항체 흡착 플레이트에 NSE검체를 넣어서 항원-항체 복합체를 형성한다.
2. 효소로 접합된 항체를 넣어 Sandwich를 형성한다.
3. 세척과정을 통하여 결합하지 못한 물질은 제거 된다.
4. 기질액을 넣어 항원-항체복합체와 결합 시킨다.
5. 검체내의 항원이 존재 하면 푸른색의 농도는 짙어진다.
6. 더 이상 발색이 안되게 반응정지액을 첨가하면 노란색을 띠게 된다.
7. 이것의 흡광도를 측정 하여 NSE의 최종농도를 측정 한다.
1. 본 진단시약은 체외진단용 으로만 사용한다.
2. 검체는 미지의 바이러스 감염을 배제할 수 없으므로 취급 시 주의한다.
3. 용혈이 심하거나, 미생물이 오염된 검체의 경우에는 부정확한 결과를 초래할 수 있으므로 가급적 사용을 자제 한다.
4. 표준액 및 정도관리혈청에 노출되었을 때에는 1% 치아염소산나트륨 용액으로 완 전히 닦아 제거한다.
5. 검체는 동결, 용해를 여러 번 반복하면 위엄성을 초래할 수 있으므로 검체 취급에 주의한다.
6. 검체 및 표준액과 정도관리혈청 등은 감염 위험성이 있는 물질로 취급 시에는 반 드시 수술용 장갑을 사용하고 취급 후 손을 깨끗이 씻도록 한다.
7. 시약병의 뚜껑을 열거나 내용물을 꺼낼 때 미생물이 오염되지 않도록 주의한다.
8. 실험에 사용된 고형 폐기물은 121℃에서 1시간 이상 고압 멸균하여 폐기한다.
9. 본 시약은 유효기간 내의 시약만 사용하되 서로 다른 롯트의 내용물은 혼용하여 사용하지 않는다.
10. 검사 시 피펫을 입에 대고 빨거나 음식물을 섭취하지 않는다.
11. 세척액 희석 시 증류수 또는 탈 이온수를 사용한다.
12. 기질액은 피부나 점막 조직에 닿지 않도록 주의한다.
13. 검체내 보존제 중 질화나트륨이 함유되어 있을 경우 위음성을 보일 수 있으므로 주의한다.
포장단위
| 원료 약품 |
96테스트/ 키트 |
480테스트/키트 |
960테스트/키트 |
| 항체 흡착 플레이트 |
1 플레이트 |
5플레이트 |
10플레이트 |
| 표 준 액 |
1mL/병 x 6병(동결건조) |
1mL/병 x 30병(동결건조) |
1mL/병 x 60병(동결건조) |
| 정도관리혈청 |
1mL/병 x 2병(동결건조) |
1mL/병 x 10병(동결건조) |
1mL/병 x 20병(동결건조) |
| 희석용 완충액 |
15mL/병 × 1병 |
70mL/병 × 1병 |
120mL/병 × 1병 |
| 접합체액 |
20mL/병 × 1병 |
100mL/병 × 1병 |
100mL/병 × 2병 |
| 농축 세척액 |
50mL/병 × 1병 |
250mL/병 × 1병 |
250mL/병 × 2병 |
| 기 질 액 |
20mL/병 x 1병 |
100mL/병 x 1병 |
100mL/병 x 2병 |
| 반응 정지액 |
20mL/병 × 1병 |
100mL/병 × 1병 |
200mL/병 × 1병 |
| 플레이트 밀봉 테이프 |
2장 |
5장 |
10장 |
| 저장방법 | 기밀용기, 냉장보관(2-8℃) |
|---|---|
| 사용기간 | 제조일로부터 36개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 별첨 |
| 보험코드 | |
| 보험약가 | |
| 보험적용일 |
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