디아키 티에스에이치 엘라이자 - 의약품 상세정보

가. 혈청을 검체로 하며, 혈구나 혈액 응고성분, 지방질이 많은 경우 원심하여 완전 히 제거한다. 또한 심하게 용혈된 검체는 위양성을 보일수 있으므로 사용하지 않는다.

나. 검체내 보존제 중 질화나트륨이 함유되어 있을 경우 위음성을 보일 수 있으므로 주의한다.

가. 모든 시약은 실험 시작 30분전 실온에 둔다.

나. 세척액의 조제

농축 세척액을 증류수 또는 이온 정제수로 20배 희석하여 필요한 양만큼 준비한다.

예) 필요량이 1000ml일 경우 농축 세척액 50ml에 증류수나 이온 정제수 950ml를 넣어 총 부피가 1000ml가 되도록 한 다음 잘 섞는다.

※ 농축 세척액은 냉장 보관 상태에서 결정이 생길 수도 있다. 이 경우에는 37℃ ± 1℃ 항온 수조에서 녹인 다음 사용한다.

가. 검사 전 준비사항

1) 모든 시약은 실험 시작 30분 전에 실온에 두고 사용 전 가볍게 흔들어 잘 섞은 후 사용한다.

2) 사용 후 남은 플레이트는 첨부된 비닐포에 방습제와 함께 잘 밀봉하여 2～8℃에 보관한다.

3) 검체는 사용 전에 충분히 혼합한 다음 사용한다. 특히 동결되었던 검체는 반드시 균질화 시킨 후 사용한다.

나. 검사 방법

1) 검사하고자 하는 검체의 수를 결정한 뒤, 필요한 양만큼 스트립을 꺼내어 스트립홀더에 고정시킨다. 이때 사용하지 않는 웰은 첨부된 비닐포에 실리카겔과 함께 밀봉하여 냉장(2～8℃)보관 하며 스트립의 웰 밑바닥은 손으로 만지지 않도록 주의한다.

2) 표준액, 정도관리혈청과 검체들을 웰에 가할 위치를 정하여 표시하고, 각 웰에 100㎕씩 차례로 분주한다.

3) 각각의 웰에 접합체액 50㎕를 분주한 뒤, 스트립홀더를 손으로 가볍게 쳐서 잘 혼합시킨다.

4) 플레이트 밀봉 테이프로 웰을 덮어 밀봉하고 실온(18～25℃) 약 300rpm으로 shaking하며 30분 동안 반응시킨다.

6) 반응이 끝난 후, 밀봉 테이프를 제거하고 모든 웰의 내용물을 흡입하여 버리고, 미리 제조한 세척액(각 웰당 300㎕ 이상)으로 5회 세척한다. 세척이 완료되면 플레이트를 흡습지에 뒤집어 적당히 쳐서 제거되지 않는 세척액을 완전히 제거한다.

7) 모든 웰에 미리 제조한 기질액을 100㎕씩 넣고 스트립홀더를 가볍게 쳐서 잘혼합시킨 뒤 실온(18～25℃), 암소에서 20분 동안 반응시킨다.

8) 반응이 완료되면 모든 웰에 반응 정지액을 100㎕씩 분주하고 골고루 섞이도록 스트립 홀더를 가볍게 쳐서 반응이 잘 일어나게 한다.

8) 플레이트 바닥을 부드러운 흡습성 종이로 잘 닦아 습기를 제거하고 측정파장 450nm/620nm에서 흡광도를 측정한다.

< 검사과정 요약 >

가. 각 표준액과 검체에 대한 흡광도 값을 계산한다.

나. 표준 곡선 작성을 위하여 X축을 표준액 농도(μIU/ml)로, Y축을 표준액의 흡광도 값으로 하여 표준곡선을 그린다.

다. 표준 곡선을 이용하여 검체의 흡광도 값을 대입하여 농도값을 산출한다.

라. 결과 계산의 예

※ 아래 값은 실험 결과의 예를 나타낸 단순한 실례이므로 실제 실험 시 적용하지 않는다.

1) 실험 결과

2) 표준 곡선 그래프

가. 정도관리혈청의 농도는 2.5～3.8 μIU , 10～15 μIU 범위 내에 포함되어야 한다.

나. 흡광도는 검체의 농도에 비례하여 증가한다.

다. 표준곡선의 기울기는 R²=0.93 이상이어야 유의하다고 판정된다.

동 제품의 반응 원리는 항체를 효소에 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 비경쟁 면역반응으로, 항체에 결합되는 효소에 기질액을 넣어 색변화를 관찰하는 방법이다.

가. 마우스 항TSH 단일클론항체가 흡착된 플레이트에 검체인 항원을 넣어준다.

나. 검체에 있는 TSH가 플레이트에 있는 TSH 항체와 결합한다.

다. 마우스 항TSH 단일클론항체-고초냉이 과산화효소 접합체액을 결합시킨다.

라. 결합하지 못한 항체와 항원은 제거한다.

마. 기질액을 넣어 효소와 결합시킨다.

바. 항원이 존재하면 푸른색을 띠게 된다.

사. 더 이상 발색이 진행 되지않게 반응 정지액을 첨가하면 노란색을 띠게 된다.

아. 이것의 흡광도를 측정하여 TSH의 최종 농도를 측정한다.