| 성상 | 1) 항체흡착 플레이트 : 무색의 폴리스틸렌 플레이트 96well로 구성된 것이다. 2) 표준액 : 담황색의 액상제제이다. 3) 정도관리혈청 : 담황색의 액상제제이다. 4) 접합체액 : 담황색의 액상제제이다. 5) 기질액 : 무색의 액상제제이다. 6) 반응 정지액 : 무색의 액상제제이다. 7) 농축 세척액 : 무색의 액상제제이다. |
|---|---|
| 업체명 | 신진메딕스(주) |
| 전문/일반 | 전문의약품 |
| 허가일 | 2011-09-26 |
| 품목기준코드 | 201107162 |
| 표준코드 | 8806623027309, 8806623027316 |
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 항체흡착플레이트 | 성분명 : Thyroxine 항체 | 분량 : 100 | 단위 : 마이크로리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(100ul/plate)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액1 | 성분명 : 소혈청알부민-인산염완충액 | 분량 : 0.5 | 단위 : 밀리리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액2 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 5 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(2.5ng/0.5ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액3 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 12.5 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(12.5ng/0.5ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액4 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 35 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(35ng/0.5ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 반응정지액 | 성분명 : 2N황산 | 분량 : 20 | 단위 : 밀리리터 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액6 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 160 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(160ng/0.5ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 정도관리혈청1 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 37.5 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(37.5ng/0.5ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 접합체액 | 성분명 : Thyroxine항원-과산화효소접합체 | 분량 : 0.5 | 단위 : 마이크로그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(0.5mg/15ml)
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 기질액 | 성분명 : 테트라메칠벤지딘 | 분량 : 0.05 | 단위 : 질량백분율 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 :
총량 : 항체흡착플레이트1개(96well), 표준액(0.5ml/병)×6병, 정도관리혈청(0.5ml/1병), 접합체액(15ml/1병), 기질액(20ml/병), 반응정지액(20ml/1병), 농축세척액(50ml/1병) - 표준액5 | 성분명 : Thyroxine 항원 | 분량 : 120 | 단위 : 나노그램 | 규격 : 자사기준 | 성분정보 : | 비고 : 단위(120ng/0.5ml)
사람 혈청에 존재하는 Thyroxine(T4)항원에 대한 정량검사
1. 검체 준비
가. 혈청을 검체로 하며, 혈구나 혈액 응고성분, 지방질이 많은 경우 원심하여 완전 히 제거한다. 또한 심하게 용혈된 검체는 위양성을 보일수 있으므로 사용하지 않는다.
나. 검체내 보존제 중 질화나트륨이 함유되어 있을 경우 위음성을 보일 수 있으므로 주의한다.
2. 시약의 조제
가. 모든 시약은 실험 시작 30분전 실온에 둔다.
나. 세척액의 조제
농축 세척액을 증류수 또는 이온 정제수로 20배 희석하여 필요한 양만큼 준비한다.
예) 필요량이 1000ml일 경우 농축 세척액 50ml에 증류수나 이온 정제수 950ml를 넣어 총 부피가 1000ml가 되도록 한 다음 잘 섞는다.
※ 농축 세척액은 냉장 보관 상태에서 결정이 생길 수도 있다. 이 경우에는 37℃ ± 1℃ 항온 수조에서 녹인 다음 사용한다.
3. 조제한 시약의 보관 조건 및 보존 기간
| 조제시약 |
보관 조건 |
보존 기간 |
| 세척액 |
2-8℃ |
60일 |
| 실온 |
30일 |
4. 개봉된 시약의 보관 조건 및 보존 기간
| 내용물 |
보관 조건 |
유효기간 |
| 항체흡착 플레이트 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 표준액 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 정도관리혈청 |
2 ~ 8℃ |
3개월 |
| 농축 세척액 |
2 ~ 8℃ |
2개월 |
| 접합체액 |
2 ~ 8℃ |
2개월 |
| 기질액 |
2 ~ 8℃ |
2개월 |
| 반응 정지액 |
2 ~ 8℃ 또는 실온 |
키트 사용기한까지 |
5. 검사법
가. 검사 전 준비사항
1) 모든 시약은 실험 시작 30분 전에 실온에 두고 사용 전 가볍게 흔들어 잘 섞은 후 사용한다.
2) 사용 후 남은 플레이트는 첨부된 비닐포에 방습제와 함께 잘 밀봉하여 2～8℃에 보관한다.
3) 검체는 사용 전에 충분히 혼합한 다음 사용한다. 특히 동결되었던 검체는 반드시 균질화 시킨 후 사용한다.
나. 검사 방법
1) 시험에 필요한 양만큼 스트립을 꺼내어 스트립 홀더에 고정시킨다.
2) 준비된 플레이트 1A ~ 2D well에 표준액을 각 농도별로 10ul 씩 2well에, 2E~2F well에는 정도관리혈청 10ul씩, 나머지 각 well에는 검체를 각각 10ul씩 차례로 분주한다.
3) 모든 well에 접합체액 100ul씩 넣고 스트립 홀더를 가볍게 쳐서 잘 혼합 후 밀봉 테이프로 밀봉하고 실온(18～25℃)에서 약 200rpm으로 shaking하며 1시간 동안 반응시킨다.
4) 반응 후 밀봉 테이프를 제거하고 각 well의 내용물을 흡입해내고 미리 제조된 세척액으로 5회 세척한다.(각 well당 350ul 이상)
5) 세척이 완료되면 플레이트를 흡습지에 뒤집어 적당히 쳐서 제거되지 아니한 세척액을 완전히 제거한 다음 기질액을 모든 well에 100ul씩 넣고 스트립 홀더를 가볍게 쳐서 잘 혼합한 후 실온(18～25℃) 암소에서 20분 동안 반응시킨다.
6) 반응이 완료되면 반응 정지액을 모든 well에 100ul씩 분주하여, 약하게 흔들어 반응이 잘 일어나게 한다.
7) 플레이트 바닥을 부드러운 흡습지로 잘 닦아 습기를 제거하고 측정파장 450nm, 참조파장(reference) 620nm에서 흡광도를 측정한다.
< 검사과정 요약 >
| plate Reagent |
표준액 |
정도관리혈청 |
검체 |
| 표 준 액 |
10ul |
- |
- |
| 검 체 |
- |
- |
10ul |
| 정도관리혈청 |
- |
10ul |
- |
| 접합체액 |
100ul |
||
| Incubation |
실온(18～25℃), 200rpm shaking, 1시간 |
||
| 세 척 |
흡입과 세척 : 350ul x 5회 (세척액) |
||
| 기 질 액 |
100ul |
||
| Incubation |
실온(18～25℃) 암소, 20분 |
||
| 반응정지액 |
100ul |
||
| 흡광도 측정(450nm/620nm) |
|||
6. 결과 계산 및 판정
가. 각 표준액과 검체에 대한 흡광도 값을 계산한다.
나. 표준 곡선 작성을 위하여 X축을 표준액 농도(ng/ml)로, Y축을 표준액의 흡광도값으로 하여 표준곡선을 그린다.
다. 표준곡선을 이용하여 검체의 흡광도 값을 대입하여 농도값을 산출한다.
라. 결과 계산의 예
※ 아래 값은 실험 결과의 예를 나타낸 단순한 실례이므로 실제 실험 시 적용하지 않는다.
1) 실험 결과
| 구분 |
O.D. |
T4 농도(ng/ml) |
|
| 표준액 1 |
0 ng/ml |
2.706 |
|
| 표준액 2 |
5 ng/ml |
2.091 |
|
| 표준액 3 |
25 ng/ml |
1.750 |
|
| 표준액 4 |
70 ng/ml |
1.266 |
|
| 표준액 5 표준액 6 |
240 ng/ml 320 ng/ml |
0.355 0.149 |
|
| 정도관리혈청 |
1.297 |
67.12 |
|
| 검체 1 |
1.964 |
12.45 |
|
| 검체 2 |
1.283 |
68.42 |
|
2) 표준 곡선 그래프
7. 측정범위 : 0.67 ng/ml ∼ 320 ng/ml
8. 정도 관리
가. 정도관리혈청의 농도는 60 ~ 90 ng/ml 범위 내에 포함되어야 한다.
나. 흡광도는 검체의 농도가 증가할수록 감소한다.
다. 표준곡선의 기울기는 R2=0.95 이상이어야 유의하다고 판정된다.
9. 반응원리
동 제품의 반응 원리는 항체를 효소에 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 경쟁 면역반응으로, 항체에 결합되는 효소에 기질액을 넣어 색변화를 관찰하는 방법이다.
가. 토끼 항싸이록신(T4) 다클론 항체가 흡착된 플레이트에 검체인 싸이록신(T4)항원을 넣어준다.
나. 싸이록신(T4)항원-고초냉이 과산화효소 접합체액을 결합시킨다.
다. 검체에 있는 싸이록신(T4)항원과 접합체액에 있는 싸이록신(T4)항원이 플레이트에 있는 싸이록신(T4)항체와 결합하기 위하여 경쟁한다.
라. 결합하지 못한 항체와 항원은 세척 과정에서 제거한다.
마. 기질액을 넣어 효소와 결합시킨다.
바. 항원이 존재하면 푸른색을 띠게 된다.
사. 더 이상 발색이 진행되지 않게 반응 정지액을 첨가하면 노란색을 띠게 된다.
아. 이것의 흡광도를 측정하여 싸이록신(T4)의 최종 농도를 측정한다.
1. 본 진단시약은 체외진단으로만 사용한다.
2. 검체는 미지의 바이러스 감염을 배제할 수 없으므로 취급 시 주의한다.
3. 용혈이 심하거나, 미생물이 오염된 검체의 경우에는 부정확한 결과를 초래할 수 있으므로 가급적 사용을 자제한다.
4. 표준액 및 정도관리혈청이 노출되었을 때에는 1% 치아염소산나트륨 용액으로 완전히 닦아 제거한다.
5. 검체를 여러 번 동결, 용해시키면 위음성을 초래할 수 있으므로 검체 취급에 주의 한다.
6. 검체 및 표준액과 정도관리혈청 등 감염의 위험성이 있는 물질의 취급시에는 반드시 수술용 고무장갑을 사용하고 취급 후 손을 깨끗이 씻도록 한다.
7. 시약병의 뚜껑을 열거나 내용물을 꺼낼 때 미생물이 오염되지 않도록 주의한다.
8. 기질액은 피부나 점막 조직에 닿지 않도록 주의한다.
9. 실험에 사용된 고형 폐기물은 121℃에서 1시간이상 고압 멸균하여 폐기한다.
10. 검사 결과에 대한 정확한 판단을 위하여 서로 다른 Lot의 시약은 혼용하지 말아야 한다.
11. 세척액 희석 시 증류수 또는 탈이온수를 사용한다.
■ 포장단위
| 원료 약품 |
96테스트/ 키트 |
480테스트/키트 |
960테스트/키트 |
| 효소흡착 플레이트 |
1 플레이트 |
5 플레이트 |
10 플레이트 |
| 표 준 액 |
0.5ml/병 x 6병 |
2ml/병 x 5병 |
4ml/병 x 5병 |
| 정도관리혈청 |
0.5ml/병 x 1병 |
2ml/병 x 1병 |
4ml/병 x 1병 |
| 접합체액 |
15ml/병 × 1병 |
100ml/병 x 1병 |
100ml/병 x 2병 |
| 농축 세척액 |
50ml/병 × 1병 |
250ml/병 x 1병 |
250ml/병 x 2병 |
| 기 질 액 |
20ml/병 x 1병 |
100ml/병 x 1병 |
100ml/병 x 2병 |
| 반응 정지액 |
20ml/병 × 1병 |
100ml/병 x 1병 |
200ml/병 x 1병 |
| 플레이트 밀봉 테이프 |
2장 |
5장 |
10장 |
| 저장방법 | 기밀용기, 냉장보관(2~8℃) |
|---|---|
| 사용기간 | 제조일로부터 12개월 |
| 재심사대상 | |
| RMP대상 | |
| 포장정보 | 사용상주의사항 뒤 별첨 |
| 보험코드 | |
| 보험약가 | |
| 보험적용일 |
서울 부산 인천 대구 광주 대전 울산 경기 강원 충북 충남 전북 전남 경북 경남 제주 세종시
