안티디토템(알에이치1) - 의약품 상세정보

혈액 샘플은 항응고제 (EDTA, heparin, citrate)가 처리된 마개가 있는 멸균 튜브에 수집한다. 2℃에서 8℃ 사이에서 보관하고 48시간 이내에 평가하여야 한다. 육안으로 어떠한 용혈현상도 발견되어서는 안 된다. 시험을 할 때, 혈액 샘플을 1200g에서 3분간 원심분리한다.

생리식염수(isotonic saline) 및 슬라이드, 시험관 랙 등을 준비한다. 시험을 할 때, 사용할 혈액 샘플은 1200g에서 3분간 원심 분리한다.

2.1 슬라이드법

1) 유리 슬라이드

2) 25µL 용 피펫

3) 도포용 막대

4) 표면 온도 40-50˚C인 뷰박스

2.2 시험관법

1) 시험관, 10 x 75 mm 또는 12 x 75 mm

2) 50µL 용 피펫

3) 원심분리기

4) 등장생리식염수(0.9% 염화나트륨)

2.3 간접항글로불린 (약D) 검사법

1) 시험관, 10 x 75 mm 또는 12 x 75 mm

2) 50µL 용 피펫

3) 원심분리기

4) 인큐베이터, 37˚C

5) 등장생리식염수(0.9% 염화나트륨)

6) 항-IgG가 포함된 항인글로불린 (AGH MAESTRIA IGG+C3D)

모든 시약은 2-8℃ 사이에 보관해야 한다. 개봉직후부터 라벨에 표기된 유효 기간까지 권장하는 방법에 따라 사용 시 시약의 성능을 보장한다. 유효기간이 경과된 제품은 사용해서는 안 된다. 또한 냉장고 밖에 노출되는 시간을 최소로 하는 것을 권장한다.

4.1 실온에서의 슬라이드법

1) 유리병 스포이드를 이용하여 시약 1방울씩 정밀하고 깨끗한 플레이트에 떨어뜨린다.

2) 25㎕의 세척하지 않은 세포 덩어리를 시약을 떨어진 플레이트에 떨어뜨린다. 방울을 떨어뜨릴 때 서로 닿지 않도록 조심한다.

3) 직격이 2에서 3cm 정도 되는 마름모꼴의 막대기 끝으로 나선의 형태로 혈액과 시약을 섞는다.

4) 30초간 실온에서 휘저음 없이 배양한다.

5) 플레이트를 잡고 3분간 회전하듯이 육안으로 엉김 현상이 보일 때까지 돌려준다.

6) 즉시 반응을 읽는다.

4.2 실온에서의 시험관법

1) 등장성의 식염수 용액 속의 5% 적혈구 부유액을 준비한다.

2) 유리병 스포이드를 이용하여 튜브에 시약 한 방울을 떨어뜨린다.

3) 50㎕의 적혈구 부유액을 넣는다.

4) 교반기로 섞어준 후, 500g에서 1분간 원심 분리한다.

5) 적혈구 덩어리가 떨어지도록 조심스럽게 흔들어주면서 육안으로 관찰한다.

6) 어떤 응집반응이 보이는지 관찰한 후 결과를 기록한다.

4.3 간접항글로불린(약D) 검사법

1) 등장생리 식염수 혹은 자가 혈청이나 혈장으로 3-5%의 적혈구 부유액을 준비한다.

2) 시험관에 항-D (RH1) 토템 혈청시약 한 방울(약 50µL)을 떨어 뜨린다.

3) 시험관에 적혈구 부유액 한 방울(약 50µL)을 가한다. 잘 섞는다.

4) 시험관을 37˚C + 1˚C에서 최소 15분에서 최대 60분 동안 배양한다.

5) 인큐베이션 후에 등장 식염수를 시험관에 가득 채워 혈구를 세 번 헹구어낸다. 마지막 세척액을 완전하게 따라낸다.

6) 항-IgG가 들어 있는 항인글로불린을 약 두 방울(약 100µL) 가한다.

7) 시험관의 내용물을 부드럽게 섞고 원심분리한다. (권장 원심분리 조건은 시험관법의 4)항을 따른다.)

8) 부드럽게 흔들어 혈구를 재 부유시키고 응집을 육안으로 검사한다.

주의: 양성 결과는 직접항인글로불린(DAT) 검사에서 음성을 보이는 경우만 유효하다.

음성 결과는 더 이상의 확인이 필요하지 않다.

주: 감염 위험 물질에의 노출을 줄이기 위해 뚜껑 잠금장치가 있는 원심분리기의 사용을 권장한다.

주: 모든 결과는 원심분리와 재부유 후 즉시 판독하여야 한다.

5.1 슬라이드, 시험관 (부드럽게 흔들어줌)

양성결과(+): 적혈구가 응집하면 양성 검사결과이며 해당항원이 있음을 나타낸다.

음성결과(-): 적혈구가 응집하지 않으면 음성 검사결과이며 해당항원이 없음을 나타낸다.

주: 혈구형 혈액형 검사와 혈청형 혈액형 검사는 항상 일치해야 한다. 두 검사결과가 일치하지 않을 때는 항상 문제를 해결해야 한다. 불일치의 해결을 위한 방법은 해당 기술 설명서를 참조한다.

5.2 간접항글로불린 (약D) 검사법

1) DAT 음성 조건에서, 검사 결과 응집이 있다면 적혈구는 약D이다.

주의: 간접항글로불린 검사에서 복합적인 응집을 보인다면 D음성 혈액과 D양성 혈액이 섞여 있다고 볼 수 있다.

2) 검사결과 응집이 없다면 적혈구는 D음성이다.