마이코뷰(Mycoview) - 의약품 상세정보

배양배지(C-medium) 내에 특정 기질(요소와 아르기닌)과 지시약(페놀레드)이 포함

되어있어 해당 미생물^*이 존재할 경우 pH의 증가로 인하여 검사 스트립내의 특정한 웰에서 색의 변화가 일어난다. 또한 9개의 항생제에 대한 감수성과 저항성 검사를

동시에 할 수 있다

* 비뇨생식계의 마이코플라즈마: Ureaplasma urealyticum(U.u), Mycoplasma hominis(M.h)

① 자궁경부와 요도 검체

우선 자궁경부 및 요도 주변을 스왑(swab)으로 닦아 청결히 한 후, 데이크론(Dacron) 또는 레이온(rayon) 소재의 스왑, 사이토브러쉬(cytobrush)를 사용

하여 검체를 채취한다. 마이코 플라즈마는 점액 세포에 강하게 붙어있으므로 잘 문질러서 정확한 검체를 얻고 운반 배지(T-broth)에 접종한다.

② 소변 검체

멸균 병에 소변의 최초 배뇨물을 채취한다.

균질한 소변을 200µl를 운반 배지(T-broth)에 접종한다.

③ 정자나 다른 소량의 용액 검체

균질한 검체 200µl를 운반 배지(T-broth)에 접종한다.

* 배양 검사는 가능한 바로 해야 하며, 검체가 접종된 운반배지(T-broth)는 실온(18~25°C)에서 6시간, 냉장에서 48시간 보관 가능하다.

① 검사 시작 전 시약의 온도를 실온으로 한다.

② 검체용 멸균 튜브, 피펫(100µl), 폐기통, 배양기(36±1°C)등은 별도로 준비한다.

③ 접종된 운반배지(T-broth) 바이알의 수만큼의 배양 배지(C-medium) 바이알과 검사 스트립을 준비한다.

① 배양 배지(C-medium)에 접종

검체가 접종된 운반 배지(T-broth)를 배양 배지(C-medium)에 반응 시켜 접종배지를 제조한다. 이때 조제된(활성화된) 접종배지는 노랑 내지 오렌지색(pH 6.6±0.1)이어야 한다. 검사 스트립에 접종하기 전에 접종배지를 피펫으로 4-5회 부드럽게 혼합한다.

② 검사스트립에 접종과 배양

검사 스트립의 12웰 각각에 접종배지를 100µl씩 가한 후, 각각의 웰에 파라핀 오일을 2 방울씩 가한다. 배양 렉에 검사 스트립을 놓고 뚜껑을 닫은

후 36°C±1°C에서 배양한다. 남은 접종 배지는 추가 희석 등을 대비하여 2~8°C에서 48시간 동안 보관한다. <‘5. 결과의 판독’의 ⑤항 참고> 자궁경부와 요도 검체는 36°C 에서 24시간 동안 검사 스트립을 배양한 후 결과를 판독한다. 소변, 정액, 기타 검체의 경우 48~72시간 까지 배양할 수 있다.

* 사용하고 남은 검사 스트립은 우너래의 용기에 방습제를 넣어 기밀하게 재포장한 후 냉장(2~8°C)에서 1개월 간 보관 가능하다.

① 밸리데이션

검사 스트립의 12개의 모든 웰이 투명해야 하며, 웰이 뿌옇게 변한 것은 세균이나 효모에 오염되었음을 의미하므로 검사를 다시 수행한다.

② 결과의 판독

결과는 각 웰의 색 변화로 판독한다. 배지가 적색이나 핑크색(알칼리pH)으로 바뀌었을 때 비뇨생식계의 마이코플라즈마가 성장한 것이며, 배지가 노랑 내지

오렌지색일 경우 비뇨생식계의 마이코플라즈마의 성장이 없는 것을 의미한다.

③ 비뇨생식계의 마이코플라즈마의 동정과 농도

다른 검사 웰을 판독하기 전에 1번 웰(성장 컨트롤)을 확인하여, 만약 색의 변화가 없다면 검사 결과는 음성이다.

- 24시간 배양 후 U.u의 확인: 2와 4번 웰이 양성이면 U.u가 10⁴CCU/ml이상을 의미한다. 만약 4번 웰만 양성이면 U.u는 10⁴CCU/ml 보다 낮은 양이 존재

함을 의미한다.

- 24~48시간 배양 후 M.h의 확인: 3과 5번 웰이 양성이면 M.h가 10⁴CCU/ml이상을 의미한다. 만약 5번 웰만 양성이면 M.h는 10⁴CCU/ml 보다 낮은 양이

존재함을 의미한다.

<유의사항>

- 다음과 같이 10³ -10⁴CCU/ml 농도 범위의 수준은 병원성 경계 수준으로 고려 되어야 한다.

. 요도염의 경우 남자 소변 검체에서 10³CCU/ml정도의 U.u

. 자궁경부, 질 검체에서 10⁴CCU/ml 농도의 U.u나 M.h

. 남자 요도 검체에서 10⁴CCU/ml 농도의 U.u.

- M.h 확인의 경우 검사 스트립의 배양은 48시간 까지 계속될 수 있다. 웰의 색은 대부분 적색으로 변하며, 드물게 엷은 핑크가 된다.

④ 항생제 내성 검사

배지가 노랑 내지 오렌지색일 경우, 균주의 성장은 웰 안에 포함된 항생제에 의해 억제된 것이다.(4~12웰)

<유의사항>

- M.h가 양성일 때, 저항성은 48시간 배양 후에 판독해야 한다.

- 접종방법이 표준화되지 않았으므로, 저항성 검사는 해석에 주의하여야 한다.

⑤ 희석이 필요한 경우

검체 중 U.u와 M.h.의 농도가 높은 경우 모든 웰이 적색이나 핑크로 변하므로, 이 경우 정확한 결과를 얻기 위해 검체를 희석하여 검사를 다시 수행한다.

<희석 방법>

- 세균 또는 효모의 오염 여부를 확인한다. (웰이 투명한지 확인 한다.)

- 냉장(2~8°C)에서 보관된 최초의 접종배지200µl(‘4. 검사과정’의 ➁항 참고)를 새로운 운반배지(T-broth)에 접종한다. 이를 새로운 배양배지(C-medium)와

혼합하여 접종배지를 만든 후 새로운 검사 스트립에 접종한다. 이 때 희석배수를 기록한다.

- 실온에서 동결 건조된 표준균주를 녹인다.(U.u ATCC27618 또는 ATCC27815)

- 배양배지(C-medium)와 운반배지(T-broth)를 혼합하여 조제된(활성화된) 접종배지에 표준균주를 접종 후(1:10), 36±1°C에서 16~20시간 동안 배양한다.

- 위의 배양액 200µl를 새로운 접종 배지에 접종한다.

- 최종적으로 준비된 접종배지는 위의 4. 검사과정의 ②항에 따라서 검사한다.

- 기준: 24시간 배양 후 1, 2, 4번 웰에서 양성이 확인되어야 한다.